1、第1章微生物技术,第1节 培养基对微生物的选择作用,微生物分类:,真核细胞型,如酵母菌、霉菌、大型真菌 (香菇、金针菇、木耳、银耳)等,原核细胞型,如细菌、放线菌、支原体、 衣原体等,病毒型,结构都相当简单,多数个体十分微小(o.1mm)的生物的总称。光学显微镜、电子显微镜没有细胞结构.一般不含有叶绿素,不能进行光合作用.,1、培养基的概念:,培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,2、培养基的成分,都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质(一般)另外还需要:pH生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)氧气、二氧化碳、渗透压等,碳
2、源、氮源、生长因子的比较,3、培养基的种类,常用于工业生产,常用于观察微生物的运动、鉴定菌种,用于微生物的分离、计数,常用于工业生产,常用于分类、鉴定,在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。例如,在培养基中加入青霉素,以抑制细菌、放线菌的生长,从而分离到酵母菌和霉菌。又如,在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长。,根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成,用以鉴别不同种类的微生物。例如,在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌:如果有大肠杆菌,其代谢产
3、物就与伊红和美蓝结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。,4、消毒与灭菌的区别,较为温和,强烈,物体表面或内部的部分微生物,全部微生物,不能,能,、煮沸消毒法:100煮沸5-6min、巴氏消毒法:70-75 下煮30min或 80 下煮15min、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源、紫外线消毒,(1)、消毒的方法:,1、灼烧灭菌:接种环、接种针、试管口、瓶口2、干热灭菌:玻璃器皿和金属用具3、高压蒸气灭菌:100kPa、121 下维持15-30min.,(2)灭菌的方法:,1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?,2.请你判断以
4、下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。(1) 培养细菌用的培养基与培养皿(2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管(3) 实验操作者的双手,答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。,答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。,旁栏思考,1下列说法正确的是()A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C除水以外的无机物只能提供无机盐D无机氮源不可能提供能量,活学活用,A,2将配制好的培养基进行灭菌应用()A灼烧灭菌 B高压蒸汽灭菌C干热灭菌 D煮沸灭菌,B,返回,微生物实验室培养基制备的基本操作程序,1、器具的灭菌2、培养基的配制3、培
5、养基的灭菌4、倒平板5、恒温箱中培养6、培养基的保存,活动二、实验操作步骤,制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌),1计算 2. 称量 3溶化(注意称量纸),(一)、操作步骤,4灭菌: 将培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅。将培养皿用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160170 下灭菌2h。,5倒平板: 待培养基冷却到50 左右时,在酒精灯附近倒平板。,3关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,叙述错误的是()A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C待培养基冷却至50 左右时进行倒平板D待平板冷却凝固约510 min后,将平板倒过来 放置,活学活用,A,、目的要明确根据所培养的微生物的种类、培养的目的配制、营养要协调注意各种营养物质的浓度和比例。、pH要适宜 细菌 pH6.57.5 真菌 pH5.06.0,(二)、培养基的配制原则,