腹泻病相关病毒学.ppt

1、病毒性腹泻研究进展,腹泻病概述和腹泻病毒检测意义临床常见的腹泻病原学检测方法博晖免疫荧光分析系统简介,Part1 腹泻病概述和腹泻病毒检测意义,腹泻病概述腹泻病发病趋势病毒等其它感染性腹泻现状病毒性腹泻临床诊断意义,腹泻病概述,腹泻病是由多种病原体、多种因素引起的以大便次数增多和大便性状改变为特点的一组疾病，是儿童患病和死亡的主要原因，也是营养不良的重要原因1。 我国每年有8.36亿人次患腹泻，其中5岁以下小儿占3亿人次。2005年中国小儿因急性腹泻死亡人数多达160万1。,1儿童腹泻病诊治专家共识中华医学会儿科分会消化学组、中华医学会儿科分会感染学组、中华儿科杂志通讯作者：陈洁浙江大学医学院

2、儿童医院（杭州310003）,腹泻病发病趋势,2全国法定传染病（腹泻类）发病数据（数据来源：卫计委网站）,腹泻病发病趋势,2013年全年（2013年1月1日零时至12月31日24时），丙类传染病共报告发病3358955例，死亡291人，报告发病率为248.07/10万,病死率0.02/10万，分别较2012年下降10.5%和51.25。3 报告中发病人数居前五位的病种依次为：手足口病、其它感染性腹泻病、流行性腮腺炎、流行性感冒和急性出血性结膜炎，占丙类报告发病总数的99.29。3 报告中死亡数居前三位的是：手足口病、其它感染性腹泻病和流行性感冒，占丙类传染病报告死亡总数的98.28。3,320

3、13年度全国法定传染病疫情情况中华人民共和国国家卫计委,病毒等其他感染性腹泻现状,2006年中国共报告其它感染性腹泻病例741809例，报告发病率为56.73/10万。既往调查农村地区人群腹泻发病率为1220/10万-3360/10万，就诊率仅为6.3%-50%。在日本，2005年3046家儿科定点监测的感染性腹泻病例就达941572例，由此可见中国其它感染性腹泻的报告病例数与实际发病水平相差甚大4。,4中国感染性腹泻监测策略的思考与建议 作者单位： 中国疾病预防控制中心疾控处应急办肠道传染病防制办 公室 ，作者： 张静， 副研究员， 主要从事传 染病监测与控制工作,病毒等其他感染性腹泻现状,

4、中国2011年其它感染性腹泻的流行病学及病原学特征：选取2011年1-52周“疾病监测信息报告管理系统”中全国31个省报告的其他感染性腹泻病例作为研究对象，共836591例；其中，具有明确病原学诊断的确诊病例59929例。其它感染性腹泻突发公共卫生事件信息中，共30起暴发疫情5。,52011年中国其他感染性腹泻监测现状分析中华预防医学杂志 CAS CSCD 2013年第4期 328-332页,共5页,病毒等其他感染性腹泻现状,2011年报告的其它感染性腹泻患者836591例，发病率为62.39/10万。病例发病年龄主要集中在0-5岁组，发病率为447.0610万（436098例），占总数的52

5、.3（436098836591），报告病例发病有2个高峰期，夏季（第23-35周），占34.33（287231/836591）；冬季（第43-52周），占23.54（196939836591）。 报告的30起疫情中，其中5起有明确病原学诊断结果。其中，4起由诺如病毒引起。2011年其它感染性腹泻确诊病例占报告病例数的716（59929836591），其中，病毒感染56687例。,52011年中国其他感染性腹泻监测现状分析中华预防医学杂志 CAS CSCD 2013年第4期 328-332页,共5页,病毒性腹泻诊断临床意义,腹泻病临床症状相似，但病毒性腹泻的治疗方案与细菌等引起的腹泻有很大不同。

6、有报道发现双重病毒或多重病毒感染的腹泻，其症状更严重，病情进展快，致死率更高。 由于肠道传染病的临床表现和常用的辅助检查缺乏明显的特异性，因此存在着疾病早期病原体诊断不明确的危险因素，从而存在着疾病早期滥用抗生素、生病期延长而增加患者痛苦和经济负担的客观因素。 因此，针对由病毒引起的腹泻研制快速准确的诊断技术，对指导临床对症治疗和避免滥用抗生素有重要意义，特别是对婴幼儿腹泻在诊断上更有意义。,6病毒性腹泻的研究进展雷炳钧，华西医科大学 ；临床内科杂志1998年第4期；,病毒性腹泻诊断临床意义,为疾病诊断和鉴别诊断、临床疗效观察和预后效果提供依据。符合循证医学原则，提升医疗诊治科学性。从症状学诊

7、治转 变为病因学诊治。客观上降低抗生素滥用，缩短不必要的病程。减少病患不必要的痛苦，降低不必要的经济负担。为不同的病因，不同的自然病史，不同的临床相，不同的预后转归提供判断依据。,快速准确的诊断方法,病毒性腹泻诊断临床意义,为流行病学监测及事件分析处理积累资料记录在人群中的传播规律为临床医生提供相对可靠的病原体感染谱，为经验性诊断和治疗提供科学依据。制定针对性的公共卫生应对策略： 隔离传染源 切断传播途径，如搞好环境卫生，个人卫生，认真洗手等 保护易感人群，如接种疫苗 明确病因学诊断可以消除不必要的恐慌，尤其是暴发疫情,病毒性腹泻诊断临床意义,为科学研究提供可靠数据为科研提供大量基础数据的支持

8、为临床和流行病学积累资料，促进研究工作的深入开展为医疗单位、相关科室的科研提供可靠检测工具、检测方法学保证,病毒性腹泻诊断临床意义,目前最常见的引起腹泻的病毒有4种，其中以轮状病毒、肠道腺病毒最为常见。病毒性腹泻中40%-60%由轮状病毒感染引起，其次是肠道腺病毒、诺如病毒、星状病毒感染6。,6病毒性腹泻的研究进展雷炳钧，华西医科大学 ；临床内科杂志1998年第4期；,病毒性腹泻诊断临床意义,轮状病毒最常见的致腹泻病毒，常温稳定，可在环境表面存活数日，粪便中可存活数月，55摄氏度30分钟灭活。粪口途径传染秋冬季高发起病急，潜伏期12天，症状期38天发热呕吐腹痛，喷射性水样腹泻，易导致脱水病程自

9、限，多数预后良好，婴幼儿较重，少数脱水死亡首次感染后可减少再次感染几率，并减轻再次感染的严重性，各型无交叉免疫，可多次感染,病毒性腹泻诊断临床意义,肠道腺病毒对温度敏感，对含氯剂和脂溶剂不敏感，抗紫外线粪口途径传染终年可发病，冬春多发病程长，多超过一周腹泻呕吐，可多器官受累，心肌炎，CNS（中枢神经系统）病程自限，预后良好，肠道腺病毒是肠套叠的重要原因，40%的肠套叠与肠道腺病毒有关感染后可获得持久免疫力，很少二次感染,病毒性腹泻诊断临床意义,诺如病毒粪口途径传染，水源、食物污染易导致爆发流行潜伏期12天，症状持续12天恶心呕吐腹部痉挛性腹泻，普遍感到病情严重，一日内多次剧烈呕吐预后良好抗体没

10、有免疫作用，可反复感染,病毒性腹泻诊断临床意义,星状病毒冬季多发潜伏期34天，症状期35天症状轻，少见脱水与迁延性腹泻有关,Part2临床常见的病原学检测方法,临床常见的病原学检测方法,免疫学方法，因检测准确、速度快、应用面广得到临床门诊的青睐！,临床常见的病原学检测方法,免疫学方法分很多种，临床常用检测方法包括：酶联免疫法（ ELISA ）、胶体金法、免疫荧光法等。,临床常见的病原学检测方法,临床常见的病原学检测方法,酶联免疫检测方法技术特点：用酶来标记特定的抗体，在检测过程中，如果样本中有相应的病毒抗原，带有酶标记的抗体就会与其结合，利用酶的催化作用，就可以检测出病毒。优点：灵敏度高，检测

11、准确缺点：操作相对复杂，一种试剂只能检测一种病毒，检测时间较长，尤其是对腹泻病毒的检测具有很大的缺点。因为，酶联免疫检测试剂一般一个检测板上有96个试剂位，而这96个试剂位不能独立使用，医院为了降低检测成本，一般都会积累样本到一定数量才进行项目检测，而对于腹泻病人来说，需要快速进行检测，因此，该方法不能够适应临床对腹泻病毒快速检测的要求。,临床常见的病原学检测方法,胶体金方法技术特点：基于免疫金染色法技术开发的试剂盒技术特点是用特定直径的胶体金颗粒来标记病毒抗体。在检测过程中分，如果样本中有病毒，就会与金标记的抗体进行结合，使其分子大小和分子量发生改变，同时颜色也会发生相应的变化，用肉眼观察颜

12、色来判断病毒类型。优点：简便，迅速缺点：胶体金的技术缺点是自动化水平低，灵敏度相对较低，主要是肉眼判别检测结果，因此检测结果容易受到人为因素干扰，特别是低浓度样本更容易产生误判，同时结果稳定时间过短，假阳性率高。,临床常见的病原学检测方法,免疫荧光法技术特点 ： 利用免疫层析技术，采用双抗体夹心法检测腹泻病毒。当待测样本加入测试卡后，待测样本中的病毒抗原与荧光标记的抗体形成反应复合物，在层析作用下，反应复合物沿硝酸纤维膜向前移动，分别被硝酸纤维膜检测区上预先包被病毒克隆抗体捕获，在检测区上形成反应带。使用荧光免疫分析仪检测反应线上的荧光值，当荧光阈值等于或高于检出限时，显示为阳性，当荧光阈值低

13、于检出限时显示为阴性，从而实现检测肠道病毒的目的。优点：半自动化，简单、快速、多病毒联合检测；检测结果半定量，避免人为肉眼主观误读，稳定时间比胶体金多一倍；方便连接医院LIS等系统。,临床常见的病原学检测方法,临床常见的病原学检测方法,综合各种因素考虑，免疫荧光法是目前临床快速诊断最佳技术。原因：多病毒联合检测、性价比最高，病因学覆盖面最广，结果准确，客观，避免肉眼主观判读，可以连接医院信息系统，极大方便医院信息共享与传递。,Part3 博晖免疫荧光分析系统简介,产品简介产品特点,产品简介,博晖免疫荧光分析系统组成,检测原理-双抗体夹心法,检测原理-免疫荧光法（双抗体夹心法）,产品简介,【检验过程】用样本取样勺（在样本稀释液瓶中）取适量粪便样本放入样本管中，震荡混匀，静置1分钟后在试剂卡加样孔处滴加2滴粪便样本稀释液，平置或放置于专用的试剂架上，15分钟后用BH400fx荧光免疫肠道四项联检仪判断结果，测试结果在1560分钟内读取。,产品简介,检测结果准确、稳定 ：半定量检测，避免肉眼主观读数。联合检测性价比高： 一次检测四种病毒，全国独家。提升信息化：检测结果自动保存、可导出、可联LIS 、HIS等医院信息系统。检测平台空间大： 未来呼吸道多病原体等检测项目将加入免疫荧光平台。,产品特点,博晖免疫荧光分析系统优点,谢谢,