1、第 五 章 分子生物学基本研究法(上) DNA、 RNA及蛋白质操作技术扉页:当你进入实验室时,要像脱去外衣那样放下你的想象力,因为实验操作中不能有一丁点儿的想象,否则,你对事物的观察就会受影响;当你翻开书本的时候,你又必须尽可能展开想象的 “ 翅膀 ” ,否则,你就不可能走在别人的前面。基因操作主要包括 DNA分子的 切割与连接、细胞转化、核酸序列分析以及基因人工合成、表达、定点突变和 PCR扩增 等,是分子生物学研究的核心技术。基因工程是指 在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子,构成遗传物质的新组合,使之进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行持续稳定的繁殖和表达 。基因工程技术是核
2、酸操作技术的一部分,只不过它 强调了外源核酸分子在另一种不同的寄主细胞中的繁衍与性状表达 。事实上,这种跨越物种屏障、把来自其它生物的基因置于新的寄主生物细胞之中的能力,是基因工程技术区别于其它生命科学技术的根本特征。重组 DNA技术发展史上的三大里程碑:一、 20世纪 40年代确定了遗传信息的携带者、即基因的分子载体是 DNA而不是蛋白质,解决了遗传的物质基础问题。二、 50年代提出了 DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制 ,解决了基因的自我复制和世代交替问题。Generalized model of semiconservative replication of DNA. New synthesis is shown in blue.三、 50年代末至 60年代,相继提出了 “ 中心法则 ” 和操纵子学说 ,成功地破译了遗传密码,阐明了遗传信息的流动与表达机制。Crick于 1954年所提出的遗传信息传递规律(即中心法则)。中心法则的演变1954年首次提出的 “中心法则 ” 1970-1980年的 “中心法则 ” 21世纪后修正的 “中心法则 ”