1、甲流乙流病毒检验进展甲流乙流病毒检验进展陕西省中医医院检验科王荔敏 流感的分型n 流感病毒属于 RNA病毒。流行性感冒是由甲（ A)、乙（ B）、丙（ C）三型流感病毒引起，n A型流感病毒常以流行形势出现，能引起世界性流感大流行，它在动物中广泛分布，并也能在动物中引起流感流行和造成大量动物死亡；n B型流感病毒常常引起局部暴发，不引起世界性流感大流行；n C型流感病毒主要以散在形式出现，主要侵袭婴幼儿，一般不引起流行。n 目前感染人的主要是甲型流感病毒中的 H1N1、 H3N2亚型及乙型流感病毒中的 Victoria和Yamagata系。流感的实验室检查n 外周血常规 ：白细胞总数一般不高或
2、者降低，重症病例淋巴细胞计数明显降低n 血生化 ：部分病例出现低钾血症，少数病例肌酸激酶、天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酐等升高。病原学相关检查n （ 1） 病毒核酸检测 ：以 RT-PCR（最好采用 real-time RT-PCR）法检测呼吸道标本（咽拭子、鼻拭子、鼻咽或气管抽取物、痰）中的流感病毒核酸。 病毒核酸检测的特异性和敏感性最好 ，且能区分病毒类型和亚型n （ 2） 病毒抗原检测 （快速诊断试剂检测 ）：快速抗原检测方法可采用胶体金和免疫荧光法。由于快速抗原检测的敏感性低于核酸检测，因此对快速抗原检测结果的解释应结合患者流行病史和临床症状综合考虑n （ 3
3、） 血清学检测 ：检测流感病毒特异性 IgM和 IgG抗体水平。动态检测的 IgG抗体水平恢复期比急性期有 4倍或以上升高有回顾性诊断意义n （ 4） 病毒的分离培养和鉴定 ：属于金标准，在流感流行季节，流感样病例快速抗原诊断和免疫荧光法检测阴性的患者建议再做病毒分离n 病毒抗原检测 （快速诊断试剂检测 ）n 血清学检测 （呼吸道病毒检测）目前我院检验科流感病毒开展的项目病毒抗原检测流程n 1. 大夫留取标本，立即送检；n 2. 检验科工作人员接收标本；n 3 检验科人员接收标本半个小时后在检验科门诊四楼窗口打化验单；病毒抗原检测的标本采集n 咽喉拭子（推荐） ：用灭菌过的棉签从口腔完全插入咽
4、喉中，以咽后壁、上鄂、扁桃体发红 部位为中心，摩擦数次，采集粘膜表皮n 鼻腔拭子 ：用灭菌过的棉签完全插入鼻腔中，摩擦鼻甲数次，采集粘膜表皮。n 鼻腔抽洗液 ：抽吸器的一侧的管子连接在抽吸泵上，另一侧的管子从外鼻孔完全插入鼻腔，启动抽吸泵采集鼻腔液在抽吸器中。将棉签浸入到鼻腔抽洗液，使标本沾到棉签上。n 注意： 应使用 泡沫或人造丝材质的 棉签采集样本 !样本采集后应 尽快送检， 如果不能及时送检，应 室温 储存在 密闭容器 中 ， 但 不可超过 24小时， 样本处理和储运不合适， 可能会造成假阴性。 采集用的棉签到检验科塔楼二楼领取。病毒抗原检测内容n 普通甲流抗原（ H1N1及其亚型， H
5、3N2及其亚型 ， H5N1及其亚型， H9N2及其亚型， H7N3及其亚型n 乙型流感抗原（ Brigit, B/R5 HongKong/5/72 Russia/69 Lee/40）病毒抗原检测 的方法和原理n 方法 ： Flu检测试剂运用胶体金标记和免疫层析技术，检测临床样本中的 Flu抗原并以可视信号的方式直接显示结果。n 原理 ：加入充分裂解的临床样本后， Flu抗原在试剂条的前段与胶体金标记的 Flu抗体结合，形成抗原 -抗体复合物，该复合物在试剂膜上层析流动，经 Flu单克隆抗体条带（ FluA或 FluB测试线）时再次结合 Flu单克隆抗体，形成双抗体夹心，并显示紫红色条带。病毒抗原检测结果的解读n 阳性 样本中含有 Flu抗原 ,n 阴性 样本中不含 Flu抗原，或者 含量低于本产品的检测水平n 建议对阴性 结果的样本进行微生物培养以确定是否感染流感，若培养结果与检测结果不同，应再次取样进行微生物培养复查
