1、组织化学组织化学 histochemistry特殊染色特殊染色 , 通过应用某些能与组织通过应用某些能与组织细胞化学成分特异性结合的显色细胞化学成分特异性结合的显色试剂试剂 ,定位地显示病变组织细胞的定位地显示病变组织细胞的特殊化学成分特殊化学成分 ,同时又能保存原有同时又能保存原有的形态改变的形态改变 , 达到形态与代谢的结达到形态与代谢的结合合 .可用于检测细胞内的酶类、糖类可用于检测细胞内的酶类、糖类、脂类、核酸、某些金属元素等、脂类、核酸、某些金属元素等。糖糖 的的 组组 织织 化化 学学糖的分类糖的分类1. 单糖和双糖2. 多糖:淀粉、纤维素、糖原3. 粘液物质(粘多糖)中性粘多糖酸
2、性粘多糖4. 糖蛋白 粘蛋白 氨基己糖 4%糖蛋白 氨基己糖 4%5. 糖脂 含有半乳糖 , 脂肪酸 ,神经氨基醇糖糖 原原一一 . 糖原的概念糖原的概念l 由多糖衍化而来,是天然存在于动物组织内的多糖l 分布:胞浆内 肝、心肌、骨骼肌l 同种葡萄糖的聚合物l 作为糖原染色的切片,必须冰冻或经特殊固定液固定后进行切片二二 .固定剂的选用固定剂的选用1. Carnoy( 冷 4 )无水乙醇 60ml 防止糖原溶于水氯 仿 30ml 增加渗透力冰 醋 酸 10ml 抵消乙醇对组织的收缩、硬脆作用*优点:固定迅速,保存肝糖原2. Gendre ( 冷 4 )苦味酸无水乙醇饱和液 80ml甲醛 15ml冰醋酸 5ml临用前混合配制3. Lillie固定液( AAF)无水乙醇 85ml冰醋酸 5ml甲醛 10ml固定液预冷 4 ,固定 24h后, 95%乙醇脱水,包埋三三 .固定中注意事项固定中注意事项1.尽可能取小块新鲜组织及时固定,不用水溶性固定液2.应用含酒精的溶液作为固定液,但最好不单独使用乙醇固定,以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳3.固定原理:使糖原与固定液之间相结合的蛋白质凝固,糖原被周围凝固的蛋白质膜保护起来,四四 .显示糖原的方法显示糖原的方法1. 碘染色2. 胭脂红染色*3. 过碘酸 -Schiff 反应4. 银浸染法