1、经典遗传学和细胞遗传学实验实验二 植物染色体压片技术,一、实验目的 1 学习植物染色体制片技术,观察有丝分裂过程中不同时期的染色体形态; 2 明确遗传的细胞学基础(微观与宏观); 3 掌握植物染色体玻片标本的制作方法。,二、实验原理 植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经染色和压片,再置于显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。,三、实验材料 洋葱根尖四、实验仪器及用具 显微镜、酒精灯、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、小烧杯、一次性培养皿五、药品和试剂 醋酸洋红染液,70乙醇,冰醋酸、无水乙醇, 酸解液(浓盐酸:95%酒精=1:1
2、) 卡诺氏固定液(无水乙醇:冰醋酸3:1),六、实验步骤实验前,先用清洗液洗涤显微镜的镜头1 取材 待根长至2cm时,上午9时摘下根尖,0.02和0.1%的秋水仙素分别浸泡 34小时(作用?)。 2 固定 经前处理的根尖放到固定液中,固定24 h,转入70乙醇中待用。3 解离 酸解,从固定液中取出根尖,用蒸馏水漂洗,分别放入1 mol/L盐酸和酸解液(浓盐酸:95%酒精=1:1)中,60度水浴解离10分钟,用蒸馏水漂洗后,放在培养皿中。,4 压片把根尖放在载玻片上,用解剖针把身长。把伸长区部分截去,加少量染液(几滴),染色10分钟,盖上盖玻片。用镊子轻轻敲打,使分生组织细胞展成薄薄一层。5 显微镜观察先在低倍镜下寻找具分裂相的细胞,然后依次转换到高倍镜,观察减数分裂各个时期染色体的行为和形态特征。 要求有12个不同分裂相。,七、实验作业1. 制作具有丝分裂图象的细胞学片子2-3张。2. 绘制细胞学片子的分裂相(至少3时期)。3. 洋葱究竟有几条染色体?4. 讨论与分析,要学会应用书本的理论来解释自己观察到的实验现象。实验报告格式,实验报告格式,每次实验报告均要有封面(到教材科自购);报告纸A4纸;实验目的实验材料实验简要步骤实验结果讨论分析,注意事项:1)染色充分2)制片时敲打均匀,掌握用力的力度。,上届同学拍的有丝分裂图,下次实验: 实验三 减数分裂制片技术及显微观察,