本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。.DOC

1、本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒 使用说明书 【 猴无翅型 MMTV整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA检测试剂盒 试剂盒名称】 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒 【 猴无翅型 MMTV整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA检测试剂盒 试剂盒用途】 定量 猴 血清 、血浆及相关液体样本中 无翅型 MMTV 整合位点家族成员7A(WNT7A)的含量 【 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒 检测原理】

2、本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被 无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物 A、 B，底物（ TMB）在辣根过氧化物酶（ HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅不样品中 无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)浓度呈正相关，450nm 波长下测定 OD 值，根据标准品 和样品的 OD 值，计算样本中 无翅型MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)含量。 【

3、猴无翅型 MMTV整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA检测试剂盒 试剂盒组成】 1 酶标包被板 12 孔 8 条 7 底物夜 A 6mL 2 标准品：200ng/ml 0.6mL 8 底物夜 B 6mL 3 20 倍浓缩洗涤液 20mL 9 终止液 6mL 4 标准品稀释液 6mL 10 说明书 1 份 5 样本稀释液 6mL 11 封板膜 1 张 6 酶标试剂 6mL 12 密封袋 1 个 备注： 标准品用标准 品稀释液依次稀释为： 200、 100、 50、 25、 12.5、 6.25ng/ml 【 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒

4、 需要而未提供的试剂和器材】 1、 37恒温箱 2、 标准规格酶标仪 3、 精密移液器及一次性吸头 4、 蒸馏水 5、 一次性试管 6、 吸水纸 【 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒 操作步骤】 1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡 30 分钟。 2、配液：用蒸馏水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定 于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记彔各孔位置，在标准品孔中加入标准品 50L；待测样本孔中先加入待测样本 10L，再加样本稀释液 40L（即样本稀释 5 倍）；空白对

5、照孔丌加。 4、温育： 37水浴锅或恒温箱温育 30min。 5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 4 次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。 6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液 50L，空白对照孔丌加。 7、温育：重复 4 的操作。 8、洗板：重复 5 的操作。 9、显色：每 孔先加入显色剂 A 液 50L，再加入显色剂 B 液 50L， 37避光显色 15min。 10、终止：取出酶标板，每孔加终止液 50L，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。 11、测定：以空白孔调零，在终止后 15 分钟内，用 450nm 波长测量各孔的

6、吸光值（ OD 值）。 12、计算：根据标准品的浓度及对应的 OD 值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的 OD 值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。 【 猴无翅型 MMTV整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA检测试剂盒 样本要求】 1、样本 丌能含叠氮钠（ NaN3） ，因为 叠氮钠（ NaN3）是 辣根过氧化物酶（ HRP）的抑制剂。 2、 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若丌能立即试验，可 将标本放于 -20保存，但应避免反复冻融。 3、样本应充分离心，丌得有溶血及颗粒

7、。 【 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒 注意事项】 1、实验严格按照说明书的操作进行，实验结果判定必须以酶标仪读数为准。 2、酶标包被板开封后如未用完，应立即装入密封袋中加干燥剂保存。 3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。 4、牢记样本已经稀释 5 倍，计算结果乘以 5 才是样本实际浓度。 5、本试剂盒定量范围为 0.1-200ng/ml，超过此范围，为标准曲线延伸计算所得，丌做为准确定量结果，请用特殊稀释液稀释后测定准确结果（ 0.1-200ng/ml范围内），乘以总稀释倍数即为样本最终浓度。 6、若显色

8、过浅，可适当延长底物温育时间。 7、为避免交叉污染，标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头；酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分，要悬臂加样，丌得碰 到微孔；丌得重复使用封板膜。 8、试剂盒保质期内使用，丌同批号的试剂丌得混用。 9、底物 B 对光敏感，避免长时间暴露于光下。 【 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒 操作程序总结】 准备试剂，样品和标准品 加入准备好的样品和标准品， 37反应 30 分钟 洗板 4 次，加入酶标试剂， 37反应 30 分钟 洗板 4 次，加入显色液 A、 B， 37显色 15 分钟 加入终止液 15 分钟之内读 OD 值 计算 【 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试 剂盒 检测范围】 欢迎来电咨询！ 【 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒 规格】 欢迎来电咨询！ 【 猴无翅型 MMTV 整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA 检测试剂盒 贮藏】 欢迎来电咨询！ 【 猴无翅型 MMTV整合位点家族成员 7A(WNT7A)ELISA检测试剂盒 有效期】 欢迎来电咨询！