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DNA逻辑门在癌症诊断中的运用.ppt

1、DNA逻辑门在癌细胞识别中的应用,王鑫瑞,利用DNA探针识别癌细胞,将特定的,与癌细胞DNA特异性结合的DNA片段连接到被标记(荧光,放射性同位素,酶等)的探针上,组成DNA分子探针。 将待测细胞DNA分离提取,然后加入DNA分子探针。由于DNA分子杂交遵循碱基互补配对原则,只有目标DNA能与探针结合,从而带有荧光信号。 分子杂交结束后将未配对的DNA单链洗脱。检测余下样品的荧光活性可知目标DNA分子的有无。,核酸探针识别识别癌细胞,细胞膜表面含有蛋白质,脂类等物质。一些膜蛋白为某一种或几种细胞所独有。细胞癌变后也会产生特有的蛋白质,例如酪氨酸蛋白激酶7和免疫球蛋白重链。 核酸适配体是一类从随

2、机合成寡居核苷酸单链中筛选出来的,能特性性结合特定蛋白或其他小分子物质的寡居核苷酸短链。(例如Sgc8c,Sgc4f,TD05等) 将能识别癌细胞产生蛋白质的核酸适配体连接在探针上,在探针上连接信号源(荧光物质等)即可使含目标蛋白的细胞被标记。而将药物分子连接在探针上则可以实现靶向给药。 核酸适配体的优势在于核酸序列的多样性。,与DNA分子探针的方法类似,核酸适配体探针法的思路依然是将目标底物特异性结合物质,探针,信号源连接起来,从而使目标物质受到信号标记,从而进行测定。不同点在于,核酸适配体识别的目标底物主要是蛋白质。 核酸适配体探针可以快速对目标膜蛋白的有无做出测定。 由于膜蛋白与细胞并非

3、一一对应关系,因此需要对多种膜蛋白进行测定,然后对分析结果进行处理。 使用逻辑门可以使分析工作自动化。,逻辑门,逻辑门又称“数字逻辑电路基本单元”。执行“或”、“与”、“非”、“或非”、“与非”等逻辑运算的电路。任何复杂的逻辑电路都可由这些逻辑门组成。,与门,只有当两个输入值同时为真时,输出才为真。(既A且B,维恩图中为交集),或门,只要输入值中存在真,输出值即为真。(A或B,并集),非门,当输入值为非真时,输出值才为真。(非A,补集),与非门,只要输入值存在非真,输出值就为真。(非A或非B或非A且非B,交集的补集),或非门,只有输入值全为非真时,输出值为真。(非A且非B,并集的补集),例如,若目标细胞含蛋白A或B,且含蛋白C,且不含蛋白D,那么目标细胞对应的信号为A OR B AND C ANDNOT D. 在实际测定中,首先找出目标细胞所属集合。用相应的蛋白质探针进行检测。设定信号强度的阈值,所得信号将转变为0和1(无和有)。将所有结果输入处理器中,处理器依照逻辑门法则计算,根据输出结果即可知目标细胞的存在情况。,谢谢观赏,

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