蛋黄卵磷脂.doc

1、蛋黄卵磷脂DanhuangluanlinzhiEgg Yolk Lecithin 93685-90-6本品系从鸡蛋黄提取精制而得的磷脂混合物。含氮（N ）应为 1.75%1.95%，含磷（P）应为 3.5%4.1%，含磷脂酰胆碱（PC）应大于 72.0%，含磷脂酰乙醇胺（PE ）应不得过 10.0%。【来源与制法】本品系以蛋黄粉为原料，经丙酮处理、脱油、脱水，再用无水乙醇提取精制而得。【性状】 本品为乳白色或淡黄色的粉末或蜡状固体，具有轻微的特臭，触摸时有轻微滑腻感。本品在乙醇、乙醚、氯仿或石油醚（沸程 4060C）中溶解，在丙酮和水中几乎不溶。皂化值 应为 195212（附录 H） 。碘值

2、应为 6573（附录 H） 。过氧化值 取本品 2.0g，精密称定，置 250ml 碘瓶中，依法进行检测（附录 H） ，应不得过 3.0。 【鉴别】 （1）取本品 0.1g，置坩埚中，加碳酸钠碳酸钾（2：1）3g，混匀，微火加热，产生的气体能使润湿的红色石蕊试纸变蓝。（2）取鉴别（1）项下遗留的残渣约 100mg，缓缓灼烧至炭化物全部消失，冷却，加水 30ml，微热使残渣溶解，滤过，滤液至试管中，滴加硫酸至无气泡产生，再加硫酸 4 滴，加钼酸钾少许，加热，应呈黄绿色。【检查】 游离脂肪酸 对照品溶液的制备 称取棕榈酸 0.512g，至 50ml 量瓶中，用正庚烷溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取

3、 2ml，至 50ml 量瓶中，用正庚烷稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备 取本品约 1g，精密称定，至 25ml 量瓶中，用异丙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。测定法 精密量取供试品溶液和对照品溶液各 1ml，分别置 20ml 具塞试管中，各加异丙醇正庚烷0.5mol/L 硫酸溶液（40：10：1）混合溶液 5.0ml，振摇 1 分钟，放置 10 分钟。供试品溶液管精密加正庚烷 3ml 和水 3ml，对照品溶液管精密加正庚烷 2ml 和水 4ml，密塞，上下翻转 10 次，静置至少 15 分钟，使分层。分别精密量取上层液 3ml，置 10ml 离心管中，加尼罗蓝指示液取尼罗蓝 0.04

4、g，加水 200ml，使溶解后，加正庚烷 100ml 振摇，弃去上层正庚烷。反复操作 4 次。取下层水溶液 20ml，加无水乙醇 180ml，混匀。本液置棕色瓶中，室温下可存放一个月1ml，在通氮条件下，用氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）滴定至溶液显淡紫色。供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）的毫升数不得大于对照品溶液消耗氢氧化钠滴定液（0.01mol/L）的毫升数。水分 取本品，照水分测定法（附录 VIII M 第一法 A）测定，含水分不得过 2.0%。甘油三酸酯、胆固醇与棕榈酸 取本品适量，用己烷异丙醇水（40:50:8）混合溶剂制成每 1ml 中含 20mg 的溶液，作

5、为供试品溶液，分别精密称取甘油三酸酯对照品、胆固醇对照品及棕榈酸对照品各适量，用上述混合溶剂分别制成每 1ml 各含 0.6mg、0.2mg、0.2mg 的甘油三酸酯对照品溶液，胆固醇对照品及棕榈酸对照品溶液，照薄层色谱法（附录 V B）试验，吸取上述供试品溶液，甘油三酸酯对照品溶液，胆固醇对照品溶液各 5l，棕榈酸对照品溶液 1l，分别点于同一硅胶 G 薄层板上，以己烷 乙醚冰醋酸（70:30:1）为展开剂，置内壁贴有展开剂湿润滤纸的层析缸中，展开后，取出，晾干。喷以硫酸铜溶液，热风吹干，在 170干燥 10 分钟，供试品溶液如显现与对照品溶液相应位置的杂质斑点，其颜色与对照品溶液所显的主斑

6、点比较不得更深。（即甘油三酸酯限度为 3.0%；胆固醇限度为 1.0%；棕榈酸限度为 0.2%） 。残留溶剂 内标溶液的制备 取正己烷适量，用正丙醇稀释制成每 1ml 含0.1mg 的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品约 0.2g,精密称定，置 20ml 顶空瓶中，精密加入内标溶液 2ml 使溶解，密封，即得供试品液。对照品溶液的的制备 分别精密称取乙醇和丙酮适量，用内标溶液稀释制成每 1ml 中分别含乙醇 0.5mg、丙酮 0.5mg 的混合溶液，精密量取 2ml，置20ml 顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。测定法 照残留溶剂测定法（附录 P）试验。以固定液为 100%聚乙二醇的毛细管柱为

7、分析柱，柱温 30；检测器为氢火焰离子化检测器（FID） ，检测器温度为 250；进样口温度为 220；载气为氮气或氦气，流速为每分钟1ml。顶空进样，顶空瓶平衡温度为 80，平衡时间为 45 分钟，进样体积为1ml。各色谱峰之间的分离度应符合要求。含乙醇应不得过 0.5%（g/g）,含丙酮应不得过 0.5%(g/g)。重金属 取本品 2.0g，缓缓灼烧炭化，加硝酸 2ml，小心加热至干，加硫酸 2ml，加热至完全炭化，在 500600灼烧至完全灰化，放冷，依法检查（附录 VIII H 第二法） ，含重金属不得过百万分之五。砷盐 取本品 1.0g，置凯氏烧瓶中，加硫酸 5ml，用小火消化使炭化

8、，控制温度不超过 120（必要时可添加硫酸，总量不超过 10ml） ，小心逐滴加入浓过氧化氢溶液，俟反应停止，继续加热，并滴加浓过氧化氢溶液至溶液无色，冷却，加水 10ml，蒸发至浓烟发生使除尽过氧化氢，加盐酸 5ml 与水适量，依法检查（附录 J 第一法） ，应符合规定（不得过 0.0002%） 。有关物质 取本品约 125mg，精密称定，置 25ml 量瓶中，用三氯甲烷-甲醇（2:1）溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试溶液。取磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、溶血磷脂酰胆碱对照品适量，用三氯甲烷-甲醇（2:1）溶解制成每 1ml 含上述对照品分别为 20g、20g 、 100g、100g

9、 的混合溶液，作为对照溶液。照磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺含量测定方法，取对照溶液10l、 20l、 30l，供试溶液 20l注入液相色谱仪，峰面积和浓度取对数，以三点对数方程法计算，含磷脂酰肌醇不得过 1.0%，含溶血磷脂酰乙醇胺不得过0.5%，含鞘磷脂不得过 3.0%，含溶血磷脂酰胆碱不得过 3.5%。微生物限度 取本品 10g，依法检查（附录 J） 。每克检出细菌数不得过1000 个，霉菌酵母菌数不得过 100 个，大肠杆菌不得检出。【含量测定】 氮 取本品约 0.1g，依法测定（附录 D 第二法） 。含氮（N）应为 1.75%1.95%。磷 对照品溶液的制备 取 105C 干燥至恒重的磷酸

10、二氢钾约 0.13g，精密称定，置 100ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，精密量取 10ml 置 100ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，每 1ml 中含磷（P)约为 30ug。供试品溶液的制备 取本品约 0.1g，精密称定，至坩埚中，加氯仿 2ml 溶解，加氧化锌 2g，蒸去氯仿，缓缓炽灼使样品炭化，然后在 600C 炽灼 1 小时，放冷，加盐酸溶液（12 ）10ml，煮沸 5 分钟使残渣溶解，转移到 100ml 量瓶中，加水稀释至刻度。标准曲线的制备 精密量取对照品 0、2、4、6、10ml，分别置 25ml 量瓶中，依次分别加水 10ml，钼酸铵硫酸溶液（取钼酸铵 5g，加 0.5

11、 mol/L 硫酸溶液100ml）1ml，对苯二酚硫酸溶液（取对苯二酚 0.5g，加 0.25 mol/L 硫酸溶液100ml，临用前配制）1ml 和 50醋酸钠溶液 3ml，并用水稀释至刻度，摇匀，放置 5 分钟。照分光光度法（附录 B） ，以第一瓶为空白，在 720nm 的波长处测定吸收度，以测得吸收度与其对应的浓度计算回归方程。测定法 精密量取供试品溶液 4ml，置 25ml 量瓶中，照标准曲线制备项下自“依次分 别 加 水 10ml”起 同 法 操 作 ， 测 得 吸 收 度 ， 由 回 归 方 程 计 算 含 磷 （P） 量 。 含 磷 （ P）应 为 3.5% 4.1%。磷脂酰胆碱

12、和磷脂酰乙醇胺 照高效液相色谱法（中国药典 2005 年版二部附录D）测定。色谱条件与系统适应性试验 用硅胶为填充剂（色谱柱 Alltima Sillica， 250mm4.6mm5m） ，柱温为 40；以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（85:15:0.45:0.05，v/v）为流动相 A，以正己烷-异丙醇-流动相A（20:48:32，v/v）为流动相 B；流速为每分钟 1ml，按下表进行梯度洗脱；检测器为蒸发光散射检测器（参考条件：漂移管温度为 72；载气流量为每分钟2.0ml） 。时间（ min） 流动相 A（%） 流动相 B（ %）0 10 9020 30 7035 95 536 10 904

13、1 10 90取磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、溶血磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、鞘磷脂、溶血磷脂酰胆碱对照品各适量，用三氯甲烷-甲醇（2:1 ）溶解制成每 1ml 含上述对照品分别为 50g、100g、100g、200g 、200g 、200g 的混合溶液，取上述溶液 20l注入液相色谱仪，各成分按上述顺序依次洗脱，各成分分离度应符合规定，理论板数按磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺峰计算应不低于 1500。标准曲线的制备 称取磷脂酰乙醇胺和磷脂酰胆碱对照品适量，精密称定，用三氯甲烷- 甲醇（ 2:1）溶解，稀释制成每 1ml 含磷脂酰胆碱50、100、150、200、300、400g，含磷脂酰乙醇胺 5、10、15、20、30、40g 的溶液作为对照溶液。精密量取上述对照溶液各 20l注入液相色谱仪中，以浓度的对数值为横坐标，峰面积的对数值为纵坐标计算回归方程。供试品溶液的制备 取本品约 15mg，精密称定，置 50ml 量瓶中，加三氯甲烷-甲醇（ 2:1）溶解并稀释至刻度。测定方法 取供试溶液 20l注入液相色谱仪中，记录色谱图，由回归方程计算磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺的含量。含磷脂酰胆碱应大于 72.0%，含磷脂酰乙醇胺应不得过 10.0%。【类别】药用辅料，乳化剂、增溶剂。【贮藏】密封、避光，低温（-15以下）保存。