选择性培养基.doc

1、葡萄糖肉浸液肉汤 Dextrose Meat Infusion Broth用途：用于溶血性链球菌的增菌培养配方：（g/L） 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 蛋白胨 10.0 磷酸氢二钾 2.0 葡萄糖 10.0 pH 值 7.5 0.1 25原理： 蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钾为缓冲剂；葡萄糖提供碳源。用法： 称取本品 30.0g,煮沸溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压 灭菌 15 分钟,备用。 质量控制： 在 36 1培养 24 小时。 质控菌株 溶血性链球菌 单增李斯特氏菌 大肠杆菌 沙门氏菌 27853 25922 14028 生

2、长情况 （10-8）+ （10-8）+ +/+/匹克氏肉汤基础 A Picks Broth BaseA用途：用于溶血性链球菌的增菌培养配方：（g/L）胰蛋白胨 10.0 牛心浸粉 20.0 叠氮钠 0.065 结晶紫 0.002pH 值 7.3-7.5 原理：25胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；脱纤维兔血（或羊血）为溶血性链球菌提供大 量生长因子；结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。 用法： 称取本品 30.0g,加热溶于 1000ml 蒸馏水中,分装, 121高压灭菌 15 分钟, 冷至 50左右时 ,加入脱纤 维羊血, 混匀。质量控制： 在 36 1培养 18-24 小时。 肉浸

3、液肉汤培养基 Meat Infusion Broth用途：用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB 标准）配方：（g/L） 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 蛋白胨 12.0 磷酸氢二钾 2.0 pH 值 7.5 0.1原理： 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；磷酸氢二钾为缓冲剂；氯化钠可维持均衡的渗透压。 用法： 称取本品 20.0g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,备用。质量控制： 在 36 1培养 18-24 小时。 25质控菌株 溶血性链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌 沙门氏菌菌株编号 ATCC32210 ATCC2592

4、3 ATCC25922 ATCC14028生长情况 + + + + 浑浊 浑浊 浑浊 浑浊叠氮钠葡萄糖肉汤 Azide Dextrose Broth 用途：用于链球菌的增菌培养配方：（g/L） 胰蛋白胨 15.0 牛肉浸粉 4.5 氯化钠 7.5 葡萄糖 7.5 叠氮钠 0.2 pH 值 7.0 - 7.4 原理： 胰蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；葡萄糖提供碳源；叠氮化钠可抑制革兰氏阴 性菌。用法： 称取本品 34.7g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 ,分装， 121高压灭菌 15 分钟,备用。质量控制： 在 36 1培养 18-24 小时。质控菌株 肠球菌 大肠埃

5、希氏菌 粪肠球菌 金黄色葡萄球菌 ATCC25922 ATCC29212 乙基紫叠氮钠肉汤 用途：用于链球菌的增菌培养配方：（g/L） 酪蛋白胨 13.5 酵母浸粉 6.5 葡萄糖 5.0 氯化钠 5.0 磷酸氢二钠 2.7 磷酸二氢钠 2.7 叠氮钠 0.4 乙基紫 0.00083 pH 值 7.0 0.2 原理： 酪蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌； 氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲剂；乙基紫作为指示剂。用法： 取本品 35.8g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,备用。质量控制： 25KF

6、 链球菌琼脂 KF Streptococcus Agar 用途：用于链球菌的选择性分离及计数（GB、SN 标准）配方：（g/L） 月示蛋白胨 10.0 酵母粉 10.0 甘油磷酸钠 10.0 氯化钠 5.0 麦芽糖 20.0 乳糖 1.0 叠氮钠 0.4 琼脂 13.0 溴甲酚紫 0.015 pH 值 7.2 0.2 原理： 月示胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；麦芽糖和乳糖为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透 压；叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌；琼脂是培养基的凝固剂；溴甲酚紫为指示剂染料。 用法：称取本品 69.4g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压 灭菌 15 分钟,冷却至

7、50-60时,加入无菌 1%TTC 溶液 10ml, 混匀, 倾入无菌平皿 ,备用。质量控制： 在 36 0.5下培养 48h。 菌 名 菌 号 生长状况 良好 被抑制 培养特征 红色或粉红色中心粪性链球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC25922肠球菌琼脂(胆盐七叶苷叠氮钠琼脂) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 用途：用于食品和水中肠球菌的计数货号：HB0133-3 配方：（g/L） 牛肉浸粉 3.0 胰酪蛋白胨 17.0 酵母粉 5.0 牛胆粉 10.0 氯化钠 5.0 七叶苷 1.0 柠檬酸铁铵 0.5 叠氮化钠 0.

8、25 柠檬酸钠 1.0 琼脂 13. pH 值 7.1 0.2 原理： 胰酪蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解 七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟基香豆素；柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性 抑菌剂，抑制非链球菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。用法： 称取本品 56.3g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压灭菌 15 分钟,冷至 45 1，倾入含 1ml 样品 液平皿中约 15ml 培养基，混匀，凝固。35 2倒置培养基培养 24 2h。注：从保温开始至做成平板时间不要超过 4h。质量控制： 在 36 0.5培养

9、 24 小时。 菌 名 菌 号 生长状况 良好 被抑制 被抑制 培养特征 棕黑色，具有棕色晕轮 粪链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC6538 ATCC25922CATC 琼脂 CATC Agar 用途：用于食品和饮料肠球菌的分离培养配方：（g/L） 胰酪蛋白胨 15.0 酵母浸粉 5.0 磷酸二氢钾 5.0 柠檬酸钠 15.0 吐温 80 1.0 碳酸钠 2.0 叠氮钠 0.4 红四氮唑(TTC)0.1 琼脂 15.0 pH 值 7.00.2 原理： 胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质，磷酸二氢钾是缓冲剂。琼脂是培养基凝固剂。 用法： 称取本品 5

10、8.5g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟, 冷至 5055时， 倾入无菌平皿， 备用。 质量控制： 25胆盐七叶苷琼脂 Bile Esculin Agar 用途：用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养配方：（g/L）蛋白胨 8.0 牛胆盐 20.0 柠檬酸铁 0.5 七叶苷 1.0 琼脂 15.0 pH 值 7.1 0.2 原理：蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子；细菌水解七叶苷与柠檬酸铁中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟 基香豆素；牛胆盐为选择性抑菌剂，抑制非链球菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。 用法： 称取本品 44.5g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,1

11、21 高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制： 在 36 1培养 22-24 小时。质控菌株 肠球菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 25922 25923 生长情况 （10-7）+ （10-7）+ 黑色 + /哥伦比亚血琼脂基础 Columbia Blood Agar Base 用途：营养非常丰富，用于各种细菌的基础培养基配方：（g/L） 酪蛋白胰酶消化物 10.0g 心胰酶消化物 3.0g 玉米淀粉 1.0g 肉胃酶消化物 5.0g 酵母浸出粉 5.0g 氯化钠 5.0g 琼脂 10.0g PH 值 7.3 0.2原理： 酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素

12、和氨基酸；淀粉 能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。 用法： 称取本品 39 克，加热溶解于 1000ml 蒸馏水中，分装，121 高压灭菌 15 分钟，冷至 45-50左右时， 加入相当于 20mg 庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素，混匀，倾入无菌平皿。 质量控制： 在 30-35培养 18-24 小时。 质控菌株 金黄色葡萄球菌 单增李斯特氏菌 大肠埃希氏菌 沙门氏菌 铜绿假单胞菌 菌株编号 ATCC 25923 ATCC 19114 ATCC 25922 ATCC 14028 CMCC 10104 生长情况 良好 良好 良好 良好 良好 有

13、黄色色素 无色透明小菌落 无色透明大菌落 无色大菌落 有绿色色素 其它特征LIM 培养基 LIM Medium 用途：用于链球菌的分离培养（Japan 方法）配方：（g/L） 牛肉粉 10.0 胰蛋白胨 20.0 葡萄糖 2.0 碳酸氢钠 2.0 氯化钠 2.0 磷酸氢二钠 0.4 pH 值 7.8 0.1 原理： 胰蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；氯化钠维持均衡的渗透压磷酸氢 二钠作为缓冲剂。用法： 取本品 36.4g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟,待培养基冷至 45-50时，加入多粘 素 E10mg 和萘啶酮酸 15mg ,混匀 质量

14、控制： 25BETA-SSA 琼脂 BETA-SSA Agar 用途：用于链球菌的选择性分离培养配方：（g/L） 蛋白胨 15.0 大豆蛋白胨 5.0 氯化钠 5.0 麦芽糖 0.25 琼脂 13.0 抑菌剂 0.0262 pH 值 7.1 - 7.5 原理： 蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；氯化钠可维持均衡的渗透压；琼脂是培养基 的凝固剂。 用法： 取本品 38.3g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,115高压灭菌 20 分钟,冷至 50左右时，无菌加入 5-10%的脱 纤维羊血，混匀，倾入无菌平皿。 质量控制： 25粪肠球菌琼脂 Enterococcus faecalis

15、 Agar用途：用于粪肠球菌的选择性分离配方：（g/L） 月示胨 0.1 麦芽糖 13.0 酵母浸粉 10.0 甘油磷酸钠 20.0 氯化钠 10.0 乳糖 10.0 溴甲酚紫 5.0 叠氮钠 1.0 TTC0.015 琼脂 0.4 pH 值 7.2 0.2 原理： 月示胨和酵母浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；叠氮化钠可抑 制革兰氏阴性菌；溴甲酚紫和 TTC 作为指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。用法： 取本品 70.0g , 加热溶解于 1000ml 蒸馏水中, 煮沸 5 分钟,冷至 50左右，倾入无菌平皿，备用。 质量控制：25缓冲蛋白胨水 Buffered P

16、eptone Water用途：用于阪崎杆菌前增菌培养（GB2008 标准）配方：（g/L） 蛋白胨 10.0 氯化钠 5.0 磷酸氢二钠(含 12 个结晶水)9.0 磷酸二氢钾1.5 pH 值 7.2 0.2 25 原理： 白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求；氯化钠可维持均衡的渗透压；磷酸二氢钾和磷酸氢二钠是 缓冲剂 用法： 称取本品 20.0g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌 15 分钟备用。 质量控制： 在 36 1培养 18-24 小时。 质控菌株 单增李斯特氏菌 沙门氏菌 菌株编号 ATCC19114 ATCC14028 生长情况 + + 浑浊 浑浊 其它特征胆

17、汁液态培养基 Bile broth 用途：用于粪链球菌的胆汁耐受试验。配方：（g/L） 猪胆粉 20.0 脑心浸液肉汤 23.1 pH 值 7.4 0.1 用法： 称取本品 43.1g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装试管,121高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制： 在 36 1培养 18-24 小时。M-肠道菌琼脂 M-Enterococcus Agar 用途：用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数（滤膜法或划线法）配方：（g/L） 胰酪蛋白胨 15.0 大豆蛋白胨 5.0 酵母浸粉 5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钾 4.0 叠氮化钠 0.4 TTC 0.1 琼脂 10.0

18、pH 值 7.2 0.2 原理： 胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质，葡萄糖提供碳源，磷酸盐是缓冲剂， 琼脂是培养基凝固剂。用法： 称取本品 42g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,煮沸 1 分钟,冷至 45-50左右时, 倾入无菌平皿。无需高压 灭菌。 质量控制： 25THB 培养基 THB Medium用途：用于链球菌增菌培养配方：（g/L） 牛肉粉 10.0 胰蛋白胨 20.0 葡萄糖 2.0 碳酸氢钠 2.0 氯化钠 2.0 磷酸氢二钠 0.4 pH 值 7.8 0.1 原理： 牛肉粉、胰蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质，葡萄糖提供碳源，氯化钠维持均衡的渗透压，

19、磷酸盐 是缓冲剂。 用法： 称取本品 36.4 g,溶解于 1000ml 蒸馏水中,121 高压灭菌 15 分钟, 待培养基冷至 45-50时, 加入多粘 素 E 10mg 和萘啶酮酸 15mg ,混匀。 25PS 琼脂 PS Agar用途：用于消化球菌的培养配方：（g/L） 蛋白胨 10.0 牛肉浸粉 3.0 酵母浸粉 3.0 葡萄糖 2.0 半胱氨酸盐酸盐0.5 氯化钙 0.008 硫酸镁 0.008 磷酸氢二钾 0.04 磷酸二氢钾 0.04 碳酸氢钠 0.4 氯化钠 0.08 吐温 80 1.0 琼脂 13.0原理：蛋白胨、牛肉浸粉 、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质，葡萄糖提供碳源，

20、磷酸氢二钾和磷酸二氢 钾是缓冲剂。氯化钠维持均衡的渗透压，琼脂是培养基凝固剂。 用法： 称取本品 33.1g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 ,分装 , 121高压灭菌 15 分钟，备用。质量控制：肠球菌肉汤 Enterococcus Broth用途：用于肠球菌增菌培养配方：（g/L） 胰蛋白胨 17.0 牛肉浸粉 3.0 酵母浸粉 5.0 牛胆粉 10.0 氯化钠 5.0 柠檬酸钠 1.0 七叶苷 1.0 柠檬酸铁铵 0.5 叠氮化钠 0.25 pH 值 7.1 0.2 原理： 胰蛋白胨和酵母浸粉、牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解 七叶苷与柠檬酸铁

21、铵中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟基香豆素；柠檬酸钠、牛胆盐和叠氮化钠为选择性 抑菌剂，抑制非链球菌的细菌。 用法： 称取本品 42.8g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121 高压灭菌 15 分钟, 备用。质量控制： 在 36 0.5培养 24 小时。 菌 名 菌 号 生长状况 良好 被抑制 被抑制 培养特征 棕黑色，具有棕色晕轮 粪链球菌 金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC6538 ATCC25922脑心浸液肉汤（BHI） Brain Heart Infusion Broth 用途：用于细菌的增菌培养配方：（g/L） 蛋白胨 10.0 脱水小牛脑

22、浸粉 12.5 脱水牛心浸粉 5.0 氯化钠 5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠 2.5 pH 值 7.4 0.2 25 原理： 蛋白胨、脱水小牛脑浸粉、脱水牛心浸粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提供能 源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂。 用法： 称取本品 38.5g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 ,121高压灭菌 15 分钟,备用。 质量控制： 质控菌株接种后于 35 0.5培养 24h，结果如下： 菌 名 菌 号 生长状况 良好 良好 良好 培养特征 肉汤混浊 肉汤混浊 肉汤混浊粪性链球菌 乙型溶血性链球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 CM

23、CC(B)32210 ATCC25922脑心浸萃液肉汤 Brain Heart Infusion Broth 用途：用于营养苛求细菌的增菌培养配方：（g/L） 月示(shi)蛋白胨 10.0 牛脑浸出粉 10.0 牛心浸出粉 9.0 氯化钠 5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠 2.5 pH 值 7.4 0.2 25 原理： 月示蛋白胨、牛脑浸出粉、牛心浸出粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提供能源； 氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂。 用法： 称取本品 38.5g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 , 121高压灭菌 15 分钟, 备用。 质量控制： 在 35 0

24、.5培养 24h， 菌 名 菌 号 生长状况 良好 良好 良好 培养特征 肉汤混浊 肉汤混浊 肉汤混浊粪性链球菌 乙型溶血性链球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 CMCC(B)32210 ATCC25922脑心浸液琼脂（BHIA） Brain Heart infusion Agar 用途：用于营养苛求细菌的增菌培养配方：（g/L） 牛脑浸粉 4.0 牛心浸粉 4.0 蛋白胨 5.0 酪蛋白胨 16.0 氯化钠 5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠 2.5 琼脂 13.5 pH 值 7.4 0.2 原理： 牛脑浸粉、牛心浸粉、蛋白胨、酪蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提

25、供能 源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂，琼脂为凝固剂。 用法： 称取本品 52.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中 ,121高压灭菌 15 分钟,备用。 25质量控制： 控菌株接种后于 35 0.5培养 24h 菌 名 菌 号 生长状况 良好 良好 良好粪性链球菌 乙型溶血性链球菌 大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 CMCC(B)32210 ATCC25922Pfizer 肠球菌选择性琼脂（PSE 琼脂） Pfizer Enterococcus Selective Agar 用途：用于粪链球菌的选择性分离和计数（SN 标准）配方：（g/L） 蛋白胨 20.0g 酵母

26、浸粉 5.0g 牛胆汁物 10.0g 氯化钠 5.0g 柠檬酸钠 1.0g 柠檬酸铁铵 0.5g 叠氮化钠 0.25g 七叶苷 1.0g 琼脂 15.0g pH 值 7.1 0.2原理： 蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解七叶苷与柠檬 酸铁铵中铁离子反应形成黑色的 6,7-二羟基香豆素；柠檬酸钠、牛胆汁物和叠氮化钠为选择性抑菌剂，抑 制非链球菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。用法： 称取本品 57.75 克，加热溶解于 1000ml 蒸馏水中，分装， 121高压灭菌 15 分钟，备用。 质量控制： 质控菌株接种后，于 35 0.5培养 24h， 菌 名

27、菌 号 生长状况 良好 培养特征 棕黑色，具有棕色晕轮 粪链球菌CMCC(B)32223金黄色葡萄球菌 大肠埃希氏菌ATCC6538 ATCC25922被抑制 被抑制 MEI 培养基 MEI Medium用途：用于一步滤膜法显色检测或计数水中的肠球菌配方：（g/L） 10.0 蛋白胨 15.0 氯化钠 1.0 七叶苷 0.05 放线菌酮 0.15 叠氮化钠 30.0酵母浸粉 0.75 显色剂 15.0 琼脂 pH 值 7.1 0.2 原理：用法：称取本品 72.0g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中, 分装三角瓶,每瓶 200ml,121高压灭菌 15 分钟,冷 至 50左右时, 每瓶加入 4.8%萘啶酮酸溶液 1ml(加入几滴 0.1N NaOH 溶液溶解)和 0.4%TTC 溶液 1ml,混 匀, 倾入无菌平皿,备用。