1、 应用微生物学论文： 临床微生物学检验的自动化应用体会 微生物学检验是临床检验的重要内容之一,查出病原、明确病因、了解药物的敏感性和 耐药性,不但有助于合理用药、提高疗效、缩短疗程,并且有利于防止耐药菌株的形成和传播,防 止由于滥用药物导致菌群失调及各种不良后果。在流行病学及预防医学中,病源学检查及其 有针对性的彻底治疗更具有重要意义。 随着临床血液、尿液及生化等检验的技术发展,自动化仪器基本得到普及。而微生物 学检验仍停留在手工操作阶段。为了提高微生物学检验的速度、效率和质量,有效地防治感 染性疾病,我们于 2006 年 10 月引进了法国生物梅里埃公司生产的 ATB 细菌鉴定及药敏 测试仪
2、,现将使用过程中的体会 介绍如下。 1 检查方法 标本经分离培养获得单个菌落后,制成适当浓度的菌悬液,根据菌落特点、形态染色性、 氧化酶试验等选择鉴定及其药敏试条,按照操作指南列出的方法每孔加入菌悬液 55ul 或 135ul,某些鉴定项目需另加液体石蜡 ,盖好试条,置恒温箱孵育 1824h(快速鉴定及药敏 44.5h)后置机上自动阅读或目测手王输入,电脑分析并打印结果。 2 检验结果 从上表看,鉴定结果与质控结果完全符合,病人及外单位送检标本的鉴定百分率亦很高, 药敏结果也符合规律,并与手工操作结果相符。 3 体会 微生物是一种微小生物,它在新陈代谢、生长繁殖过程中,某些性状会发生变异,这在
3、鉴 定上造成一定困难。传统的鉴定方法,采用试管法或微量生化反应管,手续繁琐,而且由于数 量管本身的质量或接种技术的关系,加上微生物的变异性,出现反应结果的模糊或误差,以致 常常需要反复或接种技术的关系,加上微生物的变异性,出现反应结果的模糊或误差,以致常 常需要反复多次试验才能作出判断。尤其经验不足者更感难以适应。检验的自动化,大大方 便了微生物检验工作的开展,提高了检验速度和质量。通过一年的使用,我们体会到自动化细 菌鉴定及药敏测试有如下优点: 3.1 资料库内容丰富 ,鉴定细菌的范围大,信息来源广且新:如 ATB 细菌仪鉴定试条除了 ID(或 rapid ID)试条外,由于有 Api 试条
4、的补充,所以能鉴定肠道杆菌、非肠道 G 杆菌、葡萄 菌、念球菌、奈瑟氏菌、嗜血杆菌、棒状杆菌、弯曲菌、李期特式菌属第七百余种。并且 其资料库随时更新,把新的分类和新的菌种鉴定及时带给我们。如 2007 年第一次省室内质 评中“嗜麦芽黄单胞菌”以前属于假单胞菌属,由于资料缺乏,信息来源少,绝大部分单位仍 以“嗜麦芽假单胞菌”报告; “嗜醇鞘氨醇杆菌”和“嗜糖鞘氨醇杆菌”在伯杰氏手册第 8 版中乃属黄杆菌属,且于伯杰氏手册第 9 版中将二者新列一个属鞘氨醇杆菌属 (Sphingobacterium)。 3.2 操作简便 使用自动化细菌鉴定仪的主要基本功是无菌操作,平板划线和染色镜检, 因为纯菌是鉴
5、定的关键。通过观察菌落和形态染色性,正确选用试条。而这些基本功能都是 微生物工作者必备且不难掌握的。 3.3 提高效率 如应用 ID 试条或 Api 试条进行试验, 一个试条就代替 32 个或 20 个生化 反应管,ATB 药敏试条一次可得出 1530 种抗菌素或 6 种抗菌真菌剂的药敏结果,而这在手 工操作中是难以做到的。操作过程中是连续加样而不用一管一管地接种或一片一片地贴药 敏纸片,既省时又提高工作效率。 3.4 结果准确 ,可信度高 准确性是判断检验质量水平的重要标准,质控菌株鉴定是考验 某种试验准确性的有效手段。如 ATB 机通过 32 个或 20 个生化反应项目进行细菌鉴定,观 察
6、全面,结果准确。在鉴别率低时会给出必要的补充或试验和结果判定,不用自己费力去查找 方法反复试验。本实验室所检 6 株质控菌株结果与省临床检验中心公布的结果完全符合。 药敏结果是通过对两种抗菌素浓度并结合对照孔的生长情况分析得出,从而避免了纸片法中 由于操作误差或纸片质量(药物含量和单一浓度的缺陷 )所造成的结果偏差。本室 2007 年第 1 次质评结果亦与省临床检验中心公布结果完全相符。 3.5 提早报告结果 只要接种的细菌是纯种,应用 ID 试条或 Api 试条,一般都能一次成功, 24h 即可得到结果。快速试条(rapid ID 及 rapid ATB 试条 )可在 4h(部分试条可在 2h)得出鉴 定及药敏结果,为及时、合理用药提供方便。 由于人们的观点及各地条件的不同,在微生物检验中,机器化、自动化未能在各级医院 得到普及。随着国内微生物检验技术的发展,临床微生物学检验的自动化成为必然局势,并可 大大地方便检验及临床工作人员,对合理使用抗菌素有更大的帮助。
