蛋白质-自测题2(附参考答案).doc

1、蛋白质-自测题 2（附参考答案） （一）是非题 1 一个氨基酸在水溶液中或固体状态时是以两性离子的形式存在。 2 亮氨酸的非极性比丙氨酸大。 3 肽键能自由旋转。 4 一个可以解离的基团在 pH 高于 pKa 时，该基团有一半以上可以解离。 5 纸电泳分离氨基酸是根据它们的极性性质。 6 从理论上讲，可以用 Edman 降解法完全地测定任何非折叠的多肽链。 7 一个多肽的 C 末端为脯氨酸，那末羧肽酶 A 和羧肽酶 B 都可切下该多肽的 C 末端。 8 蛋白质中主链骨架由CONHCONHCONH和NCCCNCCC等组成。 9 蛋白质中所有氨基酸用浓盐酸处理后，除色氨酸外，其它氨基酸都能正确地被

2、分析出来。 10任何一条多肽链，它都能被胰蛋白酶在精氨酸和赖氨酸处切断。 11每一种蛋白质的多肽链中，氨基酸都有一定的排列顺序，不是随机的。 12蛋白质表面氢原子之间形成氢键。 13从热力学上讲，蛋白质最稳定的构象是最低自由能时的结构。 14浓 NaCl 易破坏离子键，浓尿素易破坏氢键。 15亮氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸大多分布在球蛋白溶液分子内部形成疏水内核。 16变性后，蛋白质溶解度降低是因为中和电荷和去水膜所引起的。 17变性后的蛋白质分子量发生改变。 18切开胰岛素分子中链间两对二硫键后，分子量并不改变。 19肽键可以自由旋转，从而可出现多种空间构象。 20蛋白质变性过程都是可逆

3、的。 21. 蛋白质变性后的最显著特征是生物学活性丧失,分子量降低。 22. 具备有二级结构的蛋白质就有生物活性。 23维持蛋白质二级结构的化学键是 H 键和盐键。 24自然界里的蛋白质和多肽彻底水解后都产生 L型氨基酸。 25某化合物与茚三酮反应生成紫色复合物，该化合物必是氨基酸、多肽或蛋白质。 26一个未知蛋白质样品经酸水解后、可用异硫氰酸苯酯与之作用以准确测定它的所有氨基酸。 27原则上用异硫氰酸苯酯法（Edmam 降解法）可测定任何非封闭多肽的全部氨基酸顺序。 28双缩脲反应是测试多肽和蛋白质的一种方法，所以，凡是能发生双缩脲反应的物质必为多肽 或蛋白质。 29脯氨酸不能参与 螺旋、它

4、使 螺旋转弯。在肌红蛋白和血红蛋白的多肽链中，每一 个转弯处并不一定有脯氨酸，但是每个脯氨酸却产生一个转弯。 30大多数蛋白质的主要带电基团是由它 N 一末端的氨基酸和 C 一末端的羧基组成。 31蛋白质分子中的亚基与多肽是同义的。 32蛋白质在其水溶液中、表现出溶解度最小时的 pH 值，通常就是它的等电点。 33变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和；表面的水化膜被破坏引起的。 34血红蛋白与肌红蛋白均为氧载体，但血红蛋白与氧结合时呈现协同效应，所以血红蛋白为典 型的别构蛋白，而肌红蛋白则不是别构蛋白。 35蛋白质的 螺旋和 结构是分别通过链间和链内氢键绕曲在一起的。 36同源性蛋

5、白质不变残基通常分布在氨基酸序列中的功能位点上。 37使蛋白质绕曲折迭的主要相互作用是内部氢键的形成。 38蛋白质的二级结构是由序列中一定间隔距离的氨基酸残基间相互作用的结果。而三级结构是 序列中空间上紧靠在一起的氨基酸残基相互作用的结果。 39若在相同条件下，经纸层析法所得到的两个氨基酸的 Rf 值相同，则它们为同种氨基酸。 40沉淀的蛋白质不一定变性，变性蛋白质不一定沉淀。 （二）填空题 1根据氨基酸的结构，指出哪一个氨基酸符合下面的描述： （1）（ ）改变多肽的折叠，是因为它不是一个真正的氨基酸。在肌红蛋白和血红蛋白多肽 中，不是每一个转弯处都有一个（ ），但每一个（ ）产生一个转弯。（

6、以上三个空格代 表同一个氨基酸，这个氨基酸在形成肽键的方式上是独特的。） （2）（ ）分子是小的，并且不含硫。在一个折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。 （3）（ ） 在稳定许多蛋白质结构上起了重要作用。它是通过它们的侧链在不同（或同一条） 的多肽链之间形成一个共价键。 （4）氨基酸的碳原子用希腊字母标记，与羧基相邻的是 -碳，侧链依次是 、。 如果除了氢原子以外还有二个或三个其它的基团接在 -碳链上，这个分子就称为在 -碳上分 支。两个在 -碳上分支的相邻氨基酸残基联成的多肽结构被认为是不稳定的 -螺旋。根据这 个标准，当（ ）、（ ）和（ ）三个氨基酸相邻时，将破坏 -螺旋。 （5）在正常生理

7、条件下（pH7 左右），蛋白质中（ ）和（ ）的侧链几乎完全带正电荷， 但是（ ）的侧链仅部分带正电荷。 2当氨基酸处于等电点状态时，主要以（ ）离子形式存在。 3蛋白质分子中，肽键是由一个氨基酸的（ ）基与后一个氨基酸的（ ）基缩合而成。 4维持蛋白质构象的作用力（次级键）有（ ）、（ ）和（ ）。 5盐浓度低时，盐的加入使蛋白质的溶解度（ ），称（ ）现象，当盐浓度高时，盐的 加入使蛋白质的溶解度（ ），称（ ）现象。 6蛋白质水解时，切断（ ），随之释放出（ ）和（ ）基团，放出的基团可以用（ ）鉴 定。 7定性鉴定蛋白质最常用和简便的方法有（ ）、（ ）、和（ ）。 8用（ ）酶、（

8、）酶和（ ）酶水解肽链，专一性要比用（ ）酶和（ ） 化学试剂水解肽链差。 9断裂二硫键的普通方法是用（ ）试剂还原，在反应系统中还需要（ ）存在，然后用 （ ）保护巯基。 10在非极性环境中，假定蛋白质如膜蛋白是呈折叠状态，则（ ）侧链字在外面，（ ） 侧链由于内部相互作用，呈中性状态。 11蛋白质最低自由能构象，由于在（ ）残基之间形成共价桥键而得到增强。 12当非极性侧链氨基酸从水相中去掉后，疏水反应导致了自由能（ ）。 13在 -螺旋中，C=O 与NH 之间的氢键最稳定，因为有关的三个原子是呈（ ） 14一个蛋白质有四个半胱氨酸，如果它们结合成二硫键的话，可形成（ ）种不同的蛋白质结

9、构。 15是（ ）因素作用使一个蛋白质中的不同亚基聚合起来。 16（ ）氨基酸残基能形成氢键。 17蛋白质中的 Cys 一般呈（ ）状态。 18（ ）氨基酸在紫外光下有吸收能力。 19在下列空格中填入合适的氨基酸名称。 （l）（ ）是带芳香族侧链的极性氨基酸。 （2）（ ）和（ ）是带芳香族侧链的非极性氨基酸。 （3）（ ）是含硫的极性氨基酸。 （4）组成蛋白质的碱性氨基酸有（ ）,（ ）和（ ）酸性氨基酸有（ ）和 （ ）。 20通常沉淀蛋白质的方法有以下几种（l）（ ），（2）（ ），（3）（ ），（4） （ ），（5）（ ）。 21蛋白质分子中的共价键有（ ）,非共价健有（ ）。 22范

10、斯莱克（Vanslyke）法测定氨基氮主要利用（ ）与（ ）作用生成（ ）。 23当溶液中盐离子强度低时、可增加蛋白质的溶解度、这种现象称（ ）。当溶液中盐离子 强度高时、可使蛋白质沉淀，这种现象称（ ）。 24氨基酸在 pH=pl 的溶液中主要以（ ）离子形式存在，在 PHpl 的溶液中，大部分以 （ ）离子形式存在；在 pHpI 时，大部分以（ ）离子形式存在。 （三）单项选择题 1在下列各种氨基酸溶液中、哪一种氨基酸不具旋光性。 A.亮氨酸 B.精氨酸 C.苏氨酸 D.甘氨酸 2下列哪种氨基酸含极性侧链 A.异亮氨酸 B.苯丙氨酸 C.丙氨酸 D.半胱氨酸 3. 下列哪种氨基酸不存在于天

11、然蛋白质中 A.半胱氨酸 B.蛋氨酸 C.羟脯氨酸 D.同型半胱氨酸 4. 下列哪种氨基酸含可离解的极性侧链。 A.苯丙氨酸B.甘氨酸 C.赖氨酸 D.脯氨酸 5关于氨基酸的叙述哪一项是正确的 A.赖氨酸和精氨酸是酸性氨基酸 B.酪氨酸和苯丙氨酸均含有酚核 C.谷氨酸与天冬氨酸是碱性氨基酸 D.谷氨酰胺与天冬酰胺分别含有非 -氨基 6在生理条件（pH=7.3）下，其侧链能向蛋白质分子提供电荷的氨基酸是 A.甘氨酸 B.赖氨酸 C.酪氨酸 D.缬氨酸 7. 下面关于所示化合物结构的说明、哪项是错误的 A.它属于芳香族氨基酸 B.它含有苯酚基 C.它含有 4 个手性碳原子 D.它是苯丙氨酸的衍生物

12、 8谷氨酸在 pH10.0 的溶液中，其主要存在形式是 A.带有一个负电荷 B.兼性离子 C.带有一个正电荷 D.带有两个负电荷 9鉴别精氨酸常用 A.乙醛酸反应 B.偶氮反应 C双缩脲反应 D.坂口反应 10天冬氨酸 pK 1（COOH）1.88， pK 2（- NH 3+）9.60， pK 3（R）3.65；其等电点 A.（pK lpK 2）/2 B.（pK 2pK 3）/2 C.（pK 1pK 3）/2 D.（pK 1pK 2pK 3）/2 11下列哪种氨基酸是在蛋白质合成后由其前体转变而成 A.赖氨酸 B.羟脯氨酸 C.组氨酸 D.脯氨酸 12在 pH= 7，谷氨酸净电荷为一个负电荷时

13、 A.两个羧基是解离的 B.氨基是解离的 C.只有 -羧基是解离的 D.所有可解离的基团都是解离的 13对氨基酸中性溶液的正确说法是 A.氨基酸的中性溶液 pH7 B.氨基酸中性溶液 pH7 C.氨基酸中性溶液 pH7 D.氨基酸中性溶液是以两性离子形式存在时的溶液 14. 在蛋白质组分中、哪一种在 280nm 有最大的光吸收 A.苯丙氨酸的苯环 B胱氨酸的二硫键 C.酪氨酸的酚环 D色氨酸的吲哚环 15蛋白质分子中的肽键是由 A.氨基酸的各种氨基和各种羧基形成的 B.氨基酸的羧基与氨基间形成碳氮双键 C.氨基酸的 r-羧基与另一氨基酸的 -氨基形成的 D.一个氨基酸的 -氨基与另一个氨基酸的

14、 -羧基形成的 16多肽链主链骨架的组成是 A.CNHOCNHOCNHO B.CNOHCNOHCNOH C.CONHCONHCONH D.CHNOCHNOCHNO 17有一多肽经酸水解时产生等摩尔的 Lys,Gly 和 Ala、经胰蛋白酶水解时产生游离 的 Gly 和一个二肽、该多肽的一级结构是 A. GlyLysAlaLysAla B. AlaLysGly C. LysGlyAla D. GlyLysAla 18有一九肽，AlaAsp-ArgCys-LysTyr-Ile-GlySer，经胰蛋白酶和糜蛋白 酶同时处理将产生 A. 三个二肽和一个三肽 B. 一个四肽和一个五肽 C. 两个三肽，一

15、个二肽和 Tyr D. 四个二肽和一个 Ser 19多肽 GlyArgPheSerAla(C),经异硫氰酸苯酯降解，除去一个氨基酸后 其产物是 A. GlyArgPhe(C)SerAla(C) B. GlyArgPheSer(C)Ala C. ArgPheSerAla(C)Gly D. GlyArgSer(C)PheAla(C) 20可用来切断 Met 羧基使之形成肽键的试剂是 A. 碘乙酸 B. -巯基乙氨 C. 乙酸酐 D. 溴化氰 21蛋白质的 -螺旋 A.是由二硫键形成的周期性结构 B.可被 -巯基乙醇破坏 C.可由主链骨架的 NH 与 CO 之间的氢键来维持稳定 D.是通过疏水键来维

16、持稳定的 22对具四级结构的蛋白质进行一级结构分析时 A.只有一个自由的 -NH 2和一个自由的 -COOH B.只有自由的 -NH 2没有自由 -COOH C.只有自由的 -COOH 没有自由的 -NH 2 D.有一个以上的自由 -NH 2和 -COOH 23维系蛋白质四级结构的主要化学键是 A.二硫键 B.盐键 C.氢键 D.疏水键 24处于等电状态的蛋白质 A.分子不带电荷 B.分子最不稳定、易变性 C.分子带的电荷最多 D.溶解性最大 25. 有球状蛋白 A (pI=5.1)和球状蛋白 B (pI=6.7)的混合物，在哪种 PH 条件下电泳、 分离效果最好 A. pH=8.6 B. p

17、H=4.9 C. pH=6.4 D. pH=6.0 26有个六肽其一级结构为 GluHisArgValLysAsp，请回答下列叙述中哪 一项是正确的 A. pH12 时泳向负极 B.pH3 时泳向正极 C.pH5 时泳向正极 D.pH1l 时泳向正极 27变性蛋白质 A.颜色反应减弱 B.丧失原有的生物活性 C.理化性质不变 D.一级结构被破坏 28. 向卵清蛋白溶液中加入 0.1N NaOH 时使溶液呈碱性，加热至沸后立即冷却、此时 A.蛋白质变性沉淀出 B.蛋白质变性,但不沉淀出 C.蛋白质沉淀但不变性 D.蛋白质变性，冷却又复性 29欲从组织提取液中沉淀出有活性的蛋白质而又不使之变性的方

18、法是加入 A. 1NHCl B. 氯化汞 C. 生物碱试剂 D. 硫酸铵 30. 经测定某含有蛋白质的样品中含氮量为 5g/L,那么，蛋白质的浓度是多少 A. 50.5 g/L B. 60g/L C. 25g/L D. 31.25g/L 31球蛋白分子中哪一组氨基酸可形成疏水键 A. GluArg B. AspGlu C. PheTrp D. SerThr 32调节某一蛋白质溶液的 PH 至等电点时 A.蛋白质表面的净电荷增加 B.蛋白质表面的净电荷减少 C.蛋白质表面的净电荷不变 D.可使蛋白质稳定性降低，易于沉淀出 33蛋白质变性在于 A.一级结构被破坏 B.亚基的解聚 C.空间构象的破坏

19、 D.辅基的脱落 34关于肽键叙述正确的是: A.肽键可自由旋转 B.肽键具部分双键性质 C.肽键类似于单键性质 D.肽键为 C-C 键 35天然蛋白质中不存在的氨基酸是： A.丝氨酸 B.异亮氨酸 C.色氨酸 D.瓜氨酸 36下列肽链,不能较好形成 -螺旋的一个是： A. -Ile-Asn-Met-Val-Gln- B. -Trp-Val-Gly-Ala-Asn- C. -Ala-Pro-Tyr-Phe-Gln- D. -Ser-Phe-Ala-Gln-Lys- 37下列关于人胰岛素的叙述哪项是正确的？ A.由 60 个氨基酸残基组成，分为 A、B、C 三条链 B.由 51 个氨基酸残基组成

20、，分为 A、B 两条链 C.由 46 个氨基酸残基组成，分为 A、B 两条链 D.由 65 个氨基酸残基组成，分为 A、B、C 三条链 38下列哪种蛋白质具有三股螺旋结构： A.血红蛋白 B.肌红蛋白 C.丝心蛋白 D.原胶原蛋白 39. 血红蛋白的氧合曲线呈 S 型,这是由于下列哪种原因: A.氧与血红蛋白各个亚基的结合是互不相关的独立过程 B.第一个亚基与氧结合后增加其余亚基与氧的亲和力 C.第一个亚基与氧结合后降低其余亚基与氧的亲和力 D.因为氧使铁变成高价铁 40. 乳酸脱氢酶同工酶是两种肽链的四聚体，让这两种肽链随意组合以形成该酶,问此同工酶可 有几种? A. 2 种 B. 3 种

21、C. 4 种 D. 5 种 （四）问答题 1许多蛋白质能结合金属，哪些氨基酸可能结合金属离子？如果金属离子是 Hg+，那么哪些氨 基酸与它能紧密结合？ 2一个酶蛋白分子有 156 个氨基酸组成（氨基酸组成与解题无关），在正常情况下第 28 位氨基 酸是一个 Glu，在一个突变体中，这个酶的第 28 位 Glu 被 Asp 所代替，结果酶的活性全部丧失。 但是，这个突变体酶的第 76 位上的 Asp 再由 Glu 所代替，那么该酶的活性又全部恢复。请解释 在正常的酶蛋白中 28 位与 76 这两个氨基酸的关系。 3 混合的氨基酸能通过纸电泳分离，人们选择一个适当的 pH 能使某些氨基酸带正电荷，

22、 某些 氨基酸带负电荷。羧肽酶能够水解一个蛋白质的 C 末端氨基酸，C 末端氨基酸被水解以后，C 末 端的第二个氨基酸才能被水解。假定 某蛋白质用羧肽酶处理，产物仅仅发现 Ala 一种，并每个蛋 白质分子里平均有二个氨基酸被水解。问此蛋白质 C 末端三个氨基酸的顺序。 4下面是一个多肽，用胰凝乳蛋白酶处理以后，可以得到哪些片断？如对其水解产物再用嗅化 氢处理，可得到哪些产物？ Val-Ala-Lys-Glu-Glu-Phe-Val-Met-Tyr-Cys-Glu-Trp-Met-Gly-Gly-Ala 5下面是一个 16 肽： Leu-Met-His-Tyr-Lys-Arg-Ser-Val-C

23、ys-Ala-Lys-Asp-Gly-Ile-Phe-Ile 用胰蛋白酶水解这个 16 肽，可以得到哪些片断？ 将上述水解得到的片断，再用嗜热菌蛋白酶处理可得到哪些产物？ 661 个氨基酸残基能形成多少不同的多肽？ 7用 20 种氨基酸可以形成多少种不同的三肽？ 8根据氨基酸的 pK 值，分别求出 Gly、Asp、Lys 和 His 在 pH=1.0 pH=2.1 pH=4.0 pH=10.0 时所带的电荷。 91 个 400ml 的 L丙氨酸溶液，先调至 pH8.0，然后加入过量的甲醛，这溶液再用 0.2 摩尔的 NaOH 回滴至 pH8.0，共用掉 NaOH250ml，问原来的 L-丙氨酸

24、溶液中含有多少克。 10根据比旋表数据，计算 1.10 摩尔 Ala 水溶液的旋光度（温度为 25，测定管长为 25cm，钠 光灯作光源）。 11测得一血红素蛋白质含 0.426%的铁，计算它的最低分子量。 12一个纯酶按其重量含 1.65%Leu 和 2.48%Ile ，计算该酶的最低分子量。 13测到一个蛋白质中 Trp 残基占总量的 0.29%，计算该蛋白质的最低分子量。 14在 20 时，人血清蛋白的扩散系数是 6.1x10-7厘米 2/秒，沉降系数为 4.6s ，水的密度是 0.998 克/厘米 3，假定 20 时人血清白蛋白的偏微比容为 0.74 厘米 3/克，计算人血清白蛋白 的

25、分子量。 15如果某一纯蛋白质溶液浓度为 1%，在等电点时，于 0测得渗透压为 46mm 汞柱，计算该蛋 白质的最低分子量（假设此蛋白质溶液为理想溶液）。 16一个大肠杆菌细胞中含 106个蛋白质分子，假设每个蛋白质分子平均分子量为 40000，并且 所有的分子都处于 -螺旋构象，计算每个大肠杆菌细胞中的 蛋白质多肽链的总长度。 17假如细胞色素 C，-乳球蛋白，未知蛋白和血红蛋白从分子排阻层析上洗脱的体积依次为 118，58，37 和 24 毫升，求未知蛋白的分子量？（假定所有的蛋白质都是球型的，且都落在此 组柱的蛋白质分布范围内。 18蛋白质化学结构测定的基本原则是什么？ 19常用于蛋白质

26、多肽链 N 端和 C 端测定的方法有几种？基本原理是什么？ 20假若一条多肽链完全由丙氨酸构成，什么样的环境促使它很可能形成 -螺旋，是疏水环境 还是亲水环境？ 21分析下列各题： （1）下列氨基酸的混合物在 pH3.9 时进行纸电泳，指出哪一些氨基酸朝正极移动，哪一些朝负 极移动。 Ala，Ser，Phe，Leu，Arg，Asp，His （2）具有相同电荷的氨基酸如 Gly 和 Leu 在纸电泳时总是稍稍分离，你能作出解释吗？ （3）一个含有 Ala，Val，Lys，Thr 和 Glu 的氨基酸混合物，在 pH6.0 时进行电泳，然后用茚三 酮显色。请画出电泳后氨基酸斑点的位置，标明正极、负

27、极、原点和分不开的氨基酸。 22有一个氨基酸的混合物，它含有 Lys，Arg，Asp，Glu，Tyr，Ala，在高 pH 时加到一个阴离 子交换树脂上，如果用逐步降低 pH 的方法进行洗脱，请指出氨基酸洗脱下来的顺序。 23用 Ser，Ala，Glu，Ile 进行单向纸层析，溶剂系统是正丁醇：水：乙醇。 请指出：经纸层析以后，哪一种氨基酸离原点最远？哪一种其次，哪一种离原点最近。 24下列蛋白质混合物在什么 pH 时电泳，分离效果最好： （1）血清白蛋白（pI4.9）和血红蛋白（pI6.8） （2）肌红蛋白（pI7.0）和胰凝乳蛋白酶原（pI9.5） （3）卵清蛋白（pI4.6）、血清白蛋白（

28、pI4.9）和尿酶（pI5.0） 五、参考答案 （一）是非题 1 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14.15. 16. 17.18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25. 26. 27. 28.29. 30. 31.32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39. 40. (二) 填空题 1. (1) 脯氨酸 (2) 丝氨酸或苏氨酸(3) 半胱氨酸(桥是二硫键CH 2-S-S-CH2-) (4) 苏氨酸,缬 氨酸,亮氨酸(5) 精氨酸,赖氨酸,组氨酸；2. 兼性(两性) ；3. -氨基 -羧基 ；4. 氢键 疏 水

29、键 盐键 范德华力；5. 增加 盐溶 下降 盐析； 6. 肽键 自由-NH 3+和-COOH ；7. 双缩脲法 福林-酚试剂法 紫外吸收法；8. 胰凝乳蛋白酶 胃蛋白酶 嗜热菌蛋白酶 胰蛋白酶 溴化氢；9. -巯基乙醇 8mol/L 尿素 碘乙酸； 10. 疏水(或非极性) 亲水(或极性)；11. 半胱氨酸 ； 12. 减小； 13. 线状排列； 14. 3 种； 15. 次级键 其中主要是氢键；16. 所有的氨基酸残基 肽 键中除-C=O 与-NH 能形成氢键外 大多数氨基酸也能通过它的侧链形成氢键 ；17. 大多数由两个 半胱氨酸连接起来形成二硫键 巯基酶活性中心的半胱氨酸是以-SH 形式

30、存在；18.色氨酸 酪氨 酸 苯丙氨酸；19. (1)酪氨酸 (2)苯丙氨酸 (3)半胱氨酸 (4)精氨酸 赖氨酸 组氨酸 天冬氨酸 谷氨酸；20. (1)中性盐 (2)有机酸 (3)有机溶剂 乙醇 丙酮 (4)重金属盐 (5)生物碱试剂； 21. 肽键 二硫键 盐键 氢键 疏水力 范得华力；22. 氨基酸的 -氨基 亚硝酸 氮气 ； 23. 盐溶 盐析；24. 两性(兼性) 负(阴) 正(阳)。 (三) 单项选择题 1.D 2.D 3.D 4.C 5.D 6.B 7.C 8.D 9.D 10.C 11.B 12.D 13.D 14.C 15.D 16.C 17.B 18.C 19.C 20.

31、D 21.C 22.D 23.D 24.C 25.D 26.D 27.B 28.B 29.D 30.D 31.C 32.D 33.C 34.B 35.D 36.C 37.B 38.D 39.B 40.D (四)问答题 1.答：除了 -氨基、羧基以外，那些带电荷的基团都可以结合金属离子，一个离子化的蛋白质 能够通过形成离子键结合金属离子。许多金属离子如 Hg+和 Cu+能与氨基形成络合物。Hg +除能 与半胱氨酸上 SH 基结合外，还能与甲硫氨酸上 S 结合。 2.答：在正常酶蛋白中，28 位遇 6 位的氨基酸可能是通过一个离子键结合一起的。 3.答：电泳的迁移率随着电荷的增加而增加，随着移动分

32、子与溶剂分子之间的摩擦力增加 而减 小。由于 Val 比 Ala 有更长的侧链，所以 Val 遇到的摩擦力大于 Ala 遇到的摩擦力，移动的速度 也就慢了（尽管具有相同电荷）。 4.答：(1) 胰凝乳蛋白酶的切点是芳香族氨基酸的羧基端，这样可得到四个肽片： a. Val-Ala-Lys-Glu-Glu-Phe b. Val-Met-Tyr c. Cys-Glu-Trp d. Met-Gly-Gly-Ala （2）溴化氰作用的切点为甲硫氨酸，由(1)得到的四个肽段再处理，可得到如下产物： a. Val-Ala-Lys-Glu-Glu-Phe（溴化氰对此肽不起作用） b. Val-高丝氨酸内酯 c

33、. Tyr d. Cys-Glu-Trp （溴化氰对此肽不起作用） e. 高丝氨酸内酯 f. Gly-Gly-Ala 5.答: (1) 胰蛋白酶作用在碱性氨基酸 Lys，Arg 的羧基端，所以可得到下列四种产物： a. Leu-Met-His-Tyr-Lys b. Arg c. Ser-Val-Cys-Ala-Lys d. Asp-Gly-Ile-Phe-Ile (2) 嗜热菌蛋白酶的专一性不强，它可以作用在 Leu，Ile，Val 的 N-端位。上述的四个产物再 经嗜热菌蛋白酶处理可得到如下产物： a. Leu-Met-His-Tyr-Lys b. Arg c. Ser d. Val-Cys

34、-Ala-Lys e. Asp-Gly f. Ile-Phe g. Ile 6.答：20 61210 79 这个数目大于宇宙中估计的原子数目。 7.答：意味着三肽的三个位置上都有 20 种可能性，因为这三种选择都是独立的。所以三肽的数 目将是：20 3=8000 8.答：以下列形式表示： 9.答：W 丙 =M 丙 NNaOHVNaOH=89.060.2250/1000=4.45(克) 10.答： 25D =旋光度100/光径长度(dm) 浓度(g/1000) +1.8=旋光度100/2.5 (0.1189);所以,丙氨酸的旋光度=+0.441 11.答：最低分子量=铁原子量/铁百分含量=55.

35、8/0.426%=13098(道尔顿) 12.答：2.48%/1.65%=3/2 此酶中异亮氨酸和亮氨酸之比为 3:2;两者的分子量相同,残基分子量为 113, 所以可得最低分子 量为 13700。 13.答：186/X=0.29% X=64140 14.答：根据斯维德贝格(Svedberg)公式可以计算牛血清白蛋白的分子量: M=RTs/D(1-)= (8.31410 7)293(4.610-13) /(6.110-7)1-(0.740.998) =70253 15.答：M = CRT/ = 100.082273/4.6/(7613.6) = 50300(道尔顿) 16.答：5.08cm 1

36、7.答：以洗脱体积为横标，以分子量的对数为纵标作图，可得出血红蛋白为 64500；未知蛋白 为 52000。 18.答：基本原则包括：测定蛋白质中的氨基酸组成；蛋白质的 N 端和 C 端的测定；用两种或两 种以上的不同的水解方法将蛋白质肽链断裂，各自得到一系列大小不同的肽段；分离提纯所产生 的肽，并测定出它们的顺序；从有重叠结构的各个肽的序列中推断出蛋白质中全部氨基酸的排列 顺序。 19.答：N-端测定方法主要有：（1）二硝基氟苯法（DNP 法）。它的原理是由于蛋白质的 N-端游 离的氨基与二硝基氟苯作用产生二硝基苯基-蛋白质（DNP-蛋白质），可水解 DNP-蛋白质，分析 水解下来的 DNP

37、-氨基酸种类即可确定 N-末端。（2）异硫氰酸苯酯法（PITC 法）蛋白质中的 N- 末端氨基与 PITC 作用产生苯氨基硫甲酰蛋白质（PTC-蛋白质），后者在酸性溶液中经水解即可 释放出末端的 PTC 氨基酸，然后 PTC 氨基酸环化变为苯硫乙内酰脲（PTH），分析 PTH 的种类即 可确定其末端氨基酸。（3）Dansyl-氯法。该方法比 DNP 法更灵敏，蛋白质末端氨基酸中的氨基 与 5-二甲氨基奈磺酰氯（DNS-Cl）作用产生 DNS-蛋白质，经水解产生 DNS-氨基酸。DNS-氨基酸 在紫外光下产生强的黄色荧光。 C-端测定方法主要有肼解法和羧肽酶法。 20.答：一条多肽链形成螺旋构象

38、的推动力是所有肽键上的亚氨基和羰基之间形成的链内氢键， 在水环境中，肽键上的亚氨基和羰基既能形成内部（-螺旋内）的氢键，也能与水分子形成氢 键。如果后者发生，多肽链呈现类似变性蛋白质那样的伸展构象。疏水环境对于氢键的形成不能 提共任何竞争，因此，更可能促进 -螺旋结构的形成。 21.答:（1）Ala、Ser、Phe、Leu 的等电点 pH 6.0 左右,故都有正电荷,都向负极移动;His、Arg 等电点分别是 7.6 和 10.8,在 PH3.9 时都带正电荷,向负极移动,但带电量不同,所以两者能分开; AspPI 是 3.0,故向正极移动. (2)Leu 比 Gly 走得慢(前者分子量大) (3)PH6.0 时,Glu 带负电荷,朝正极移动,Lys 带正电荷朝负极移动.Val、Ala、Thr 它们的等电点 PH6.0 附近,虽可以分开但分得不清楚.如下图: 22.答:其洗脱顺序为:ArgLysThrAlaGluAsp 23.答:正丁醇(有机溶剂)为流动相,Ile 在流动相溶解度较大,其次 Ala,Glu 为极性氨基酸,在固 定相(水相)亲和力最大,其次为 Ser.所以它们离原点的顺序是: 原点:Glu Ser Ala Ile 溶剂前沿 24.答:(1)5.85 (2)8.25 (3)4.9 (注:样品点在中间)