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实验室生物安全标准操作规程(中心).doc

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4、 1 月 11 日发布 2010 年 1 月 20 日实施 庄河市动物疫病预防控制中心 修 订 表 版 号 规程号 修订次序 修 订 内 容 批 准 日 期 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC-2010 第 1 页 共 1 页 第 1 版 第 0 次 修订修 订 表 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 目 录 ZHCADC-PGC01-2010 BSL-2 实验室个人防护装备的总体要求 ZHCADC-PGC02-2010 实验室人员进出实验室 ZHCADC-PGC03-2010 实验室检测样品采集 ZHCADC-PGC04-2010 实验室检测样品

5、包装和运送 ZHCADC-PGC05-2010 实验室检测样品接收 ZHCADC-PGC06-2010 样品检测操作规程 ZHCADC-PGC07-2010 电气设备操作规程 ZHCADC-PGC08-2010 实验室消毒剂配制标准操作规程 ZHCADC-PGC09-2010 无菌间使用标准操作规程 ZHCADC-PGC10-2010 实验室废弃物处理标准操作规程 ZHCADC-PGC11-2010 实验室消毒标准操作程序 ZHCADC-PGC12-2010 实验室意外事故处理 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC-2010 第 1 页 共 1 页 第 1 版 第 0 次

6、 修订目 录 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 1 目的 个人防护装备是减少操作人员暴露于气溶胶、喷溅物以及意外接种等危险的一 个屏障。为了实验人员的安全,以保证实验室人员的安全及实验室环境不被污染。 2 适用范围 适用于生物安全实验室选用个人防护装备(防护口罩、防护手套、防护服与防 护鞋)的质量控制。 3 职责 实验室组织有关人员采购符合要求的个人防护装备,并且严格控制其质量。 4 过程要求 实验室所用的个人防护装备应符合国家标准 GB19489-2008实验室生物安全通 用要求 。在生物因子危害评估的基础上,按不同级别的防护要求选择适当的个人防 护装备。 4.1 防

7、护口罩 根据病原微生物实验室生物安全管理条例 、GB19489-2008实验室生物安全 通用要求 、 医用防护口罩技术要求 ,生物安全实验室选用 P2 级的防护口罩,必 须满足 GB 19083-2003 以下条件: (1)长方形口罩展开后中心部分尺寸:长度不小于 17cm、宽度不小于 17cm; 密合型拱形口罩尺寸:横径不小于 14cm,纵径不小于 14cm。 (2)口罩表面不得有破洞、污渍;口罩带应调节方便,应有足够强度固定口罩 位置。每根口罩带与口罩体连接点的断裂强力应不小于 10N。 (3)口罩滤料的颗粒过滤效率应不小于 95;经环氧乙烷灭菌的口罩,其环氧 乙烷残留量应不超过 10g/

8、g;不能从防护口罩中检出致病菌;口罩对皮肤无刺激。 4.2 防护手套 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC01-2010 第 1 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室个人防护装备的总体要求 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 实验室防护手套选择用国内生产的一次性乳胶手套和耐酸碱手套。技术要求见 国标 GB7543-1996 4.3 防护鞋及鞋套 防护鞋应该选择耐磨、防滑和舒适的合成材料制成的鞋类。 鞋套应为塑料材质制成,可防水、要求一次性使用。 4.4 防护服 BSL-2 实验室试验操作人员的防护服装主要选择一次性的连体防护服,通常选用

9、 国内厂商合格的防护服。上下连体式,宜连鞋帽,无口袋、无横褶、腰带、接缝封 缝、光洁。发尘量小、不易发生纤维剥落、断丝;不易产生静电和粘附粒子;耐有 机溶剂,透明度低、柔软、舒适、不妨碍动作。 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC01-2010 第 2 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订BSL-2 实验室个人防护装备的总体要求 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 1 目的 制定 BSL-2 实验室人员进出的标准操作程序,保障实验室生物安全。 2 适用范围 适用于 BSL-2 实验室人员进出程序。 3 职责 实验室工作人员执行本程序的规定。各

10、科室负责人负责监督执行。 4 规程要求 4.1 进入程序 4.1.1 实验室人员需将外衣挂入休闲吧内,避免将外衣与工作服混放。 4.1.2 实验室人员进入实验室前在人员位置示意图上做好标记,将自己的名字磁扣 贴在欲达到的位置。 4.1.3 实验室工作人员进入 BSL-2 更衣室,脱掉自已所穿鞋,放入外侧鞋柜内,转 向内侧,从内侧鞋柜取出工作鞋换上。 4.1.4 实验室工作人员进入更衣室,穿上医用白大褂或连体工作服。 4.1.5 按要求戴手套,口罩等防护用品。 4.2 退出程序 4.2.1 试验结束后,实验室工作人员在实验室脱掉一次性口罩和一次性乳胶手套和 一次性防护服,装入高压灭菌袋中。 4.

11、2.2 实验室工作人员先用 0.5%新洁尔灭对手进行消毒,再用消毒肥皂洗手。实验 室工作人员在更衣室脱下医用白大褂,打开更衣室的紫外灯进行紫外消毒。 4.2.3 实验室工作人员在更衣室脱掉工作鞋,放入内侧鞋柜,转向外侧,从外侧鞋 柜中取出自己所穿鞋。 4.2.4 实验室工作人员退出实验室后,将 BSL-2 实验室入口门关好,将人员示意图 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC02-2010 第 1 页 共 1 页 第 1 版 第 0 次 修订BSL-2 实验室人员进出实验室 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 上标记复位,离开实验室。 1 目的 为保障

12、检测实验的顺利进行,规范采样程序,防止病原微生物在采样过程中产 生污染。 2 适用范围 适用于实验室样品的采集。 3 职责 3.1 采集检测样品的工作人员在采集过程中应当防止病原扩散,并对样本的来源、 采集过程和处理方法等作详细记录。 3.2 检验人员必须严格按照本操作规程操作,不可擅自做出超出本规程的操作,所 有实验人员对所从事的工作负相应的责任。 4 过程要求 4.1 工作要求 采集和处理检测样品应当具备下列条件: 4.1.1 具有采集、处理样品所需要的生物安全防护设备; 4.1.2 具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员; 4.1.3 具有有效的防止病原扩散的措施; 4.1.4 具有保

13、证检测样品质量的技术方法和手段。 4.2 实验材料 准备灭菌的解剖器械(剪刀、镊子、手术刀、大刀、斧头等) 、灭菌试管、平皿 或自封袋、载玻片、棉签、营养肉汤、30%、50%甘油盐水缓冲液、加抗生素的 PBS(病毒保存夜) 、50甘油磷酸盐缓冲液、酒精灯、灭菌注射器、15mL 的离心管、 1.5mLEP 管、记号笔、签字笔、防护服、无粉乳胶手套、防护口罩、铅笔、空白标签 纸、胶布、75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒药品、采样单等。 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC03-2010 第 1 页 共 4 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室检测样品采集 201

14、0 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 4.3 活畜样品的采集 4.3.1 血清样品的采集 4.3.1.1 采血方法 对采血部位的皮肤先剃(拔)毛,碘酊消毒, 75%的酒精消毒,待干燥后采血。 采血方法推行生猪站立式前腔静脉、牛羊站立式颈静脉、禽类翅静脉采血,采血过 程严格无菌。 4.3.1.2 采血数量 单一病种抗体监测的每头(只)采集 23mL 全血,多病种抗体检测的每头(只) 采集 510mL 全血。 4.3.1.3 全血保存 采集好的全血转入盛血试管,斜面存放,室温凝固后直接放在盛有冰块的保温 箱,送实验室。从全血采出到血清分出的时间不超过 10h。 4.3.1.4 血清分

15、离 凝固全血在室温 24h 后,有血清析出时,用无菌针剥离血凝块,然后放入 4冰箱 48h 后,待大量血清析出时,吸出血清。必要时经离心机 3000rpm 、30min 离心,吸出血清。分离的血清,一般不加防腐剂。血清若在 12 周内即可 检验,可放在 4冰箱内保存;如果保存时间较长,应放在-20-80冰箱内保存。 运送血清时可将血清放在盛有冰块的保温箱中运送。 4.3.2 全血样品的采集 全血采集后应直接注入盛有抗凝剂的试管中,立即摇动,充分混合。也可将全 血液注入盛有玻璃珠的灭菌瓶中,立即连续振荡脱纤维蛋白。 4.4 活禽样品的采集 咽喉拭子的采集:将棉签插入喉头口及上颚裂处来回刮 35

16、次取咽喉分泌液, 泄殖腔拭子的采集:将棉签插入取泄殖腔转 23 圈并沾取少量粪便,再将咽喉拭子、 泄殖腔拭子一并放入盛有 0.81.0mL 加有抗生素 PBS 的 EP 管中,加盖,编号。 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC03-2010 第 2 页 共 4 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室检测样品采集 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 4.5 病死(屠宰)畜禽样品的采集 4.5.1 解剖前检查 急性死亡的牛、羊、猪、马等动物,解剖之前应作临床检查,疑似炭疽病的应 采血、镜检,排除炭疽病时,方可解剖。动物死亡后应在 6h 内进行剖检。解剖人

17、员 要做好自我防护工作。 4.5.2 肝、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏样品的采集 在肝、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏有病变的部位各采取 23cm 3的小方块, 分别置于灭菌的试管或平皿中。其他畜禽采集整个心脏,置于自封袋中。细菌分离 样品的采集可用烧红的刀片烫烙脏器表面,在烧烙部位刺一孔,用灭菌后的铂金耳 伸入孔内,取少量组织或液体,作涂片镜检或划线接种于适宜的培养基上。 4.5.3 脑、脊髓样品的采集 取脑、脊髓 23cm 3浸入 50%甘油盐水中或将整个头部(猪、牛、马除外)割下, 用消毒纱布包裹,置于不漏水的容器中。 4.5.4 肠、肠内容物及粪便样品的采集 肠样品的采集:选择病变最

18、严重的部分,将其中的内容物弃去,用灭菌的生理 盐水轻轻冲洗后,置于试管中。肠内容物样品的采集:烧烙肠壁表面,用吸管扎穿 肠壁,从肠腔内吸取肠内容物,放入盛有 30%甘油盐水中或者直接将带有粪便的肠管 两端结扎,从两端剪断。粪便样品的采集:用棉签插到直肠黏膜表面采集粪便,然 后将拭子放入盛有 30%甘油盐水中。 4.5.5 液体病料样品的采集 采集胆汁、脓、粘液、关节液、水泡液等样品时,用药物或烫烙法消毒采样部 位,用灭菌吸管(毛细吸管、注射器)经消毒部位插入,吸取内部液体,然后将病 料注入灭菌试管中,加盖。也可用接种环经消毒部位插入,提取病料直接接种在培 养基上。 4.5.6 胎儿样品的采集

19、实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC03-2010 第 3 页 共 4 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室检测样品采集 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 取流产后的整个胎儿,装入自封袋或不透水塑料薄膜中。 4.5.7 皮肤样品的采集 用清水清洗病变皮肤后,取病变皮肤 35g 放入灭菌小瓶中,加适量 50甘油 磷 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC03-2010 第 4 页 共 4 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室检测样品采集 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 酸盐缓冲液(pH7.4),加盖密

20、封。 4.5.8 死(屠宰)禽样品的采集 死(屠宰)禽样品的采集除按上述方法采集,也可将整个死禽装入不透水塑料 薄膜袋或自封袋中或其他容器内。 4.6 组织样品采集完后的无害化处理 活畜禽、病死畜禽组织样品采集完后,应做好样品外包装和环境消毒以及病死 畜禽及其产品的无害化处理。 4.7 样品编号、抽样单填写 4.7.1 样品编号 每头动物的不同部位的组织样品应单独包装。包装好后,在样品袋或平皿外贴 上标签,标签注明动物种类代号(Z 表示猪,N 表示牛,¥表示羊,J 表示鸡,Y 表 示鸭,E 表示鹅) 、样品名称、样品编号、采样日期等,全市每种动物血清样品,每 次单独包装,每种动物样品编号每月由

21、 1、2、3、4阿拉伯数字连续编号。 4.7.2 抽样单填写 同时填写动物血清和组织(拭子)抽样单、流行病学调查表、动物检测样品送 检单和动物疫病预防控制中心接诊单。动物血清和组织(拭子)抽样单一式三份, 一份由被抽样单位保存、一份由送检单位保存、一份由检测单位保存(原始记录) 。 动物检测样品送检单一式两份,一份由送检单位保存,一份由检测单位保存。动物 疫病预防控制中心接诊单一式两份,一份由送检单位保存,一份由检测单位保存 (原始记录) 。 1 目的 维护检测样品的质量,防止病原的泄漏和扩散,保障样品检测的顺利开展。 2 适用范围 适用于检测样品的包装和运送。 3 职责 3.1 操作者必须严

22、格按照本程序操作,不可擅自做出超出本程序的操作,所有实验 人员对所从事的工作负相应的责任。 3.2 实验室负有对样品包装、运输的监督和管理职责,并监督检查相关工作人员的 安全工作程序和行为。 4 过程要求 拟运输的样品,要求严密包装,外表加以消毒,编号、登记后,贴上“生物危 险”标识,并严防标识脱落。样品必须经三层包装。 4.1 样品的包装 4.1.1 内包装 4.1.1.1 必须是不透水、防泄漏的主容器,保证完全密封。 4.1.1.2 必须是结实、不透水和防泄漏的辅助包装。 4.1.1.3 必须在主容器和辅助包装之间填充吸附材料。吸附材料必须充足,能够吸 收所有的内装物。多个主容器装入一个辅

23、助包装时,必须将它们分别包装。 4.1.1.4 主容器的表面贴上标签,注明样品类别、编号、名称、数量等信息。 4.1.1.5 相关文件,例如毒种或样本数量表格、危险性声明、信件、毒种或样本鉴 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC04-2010 第 1 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室检测样品包装和运送 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 定资料、发送者和接收者的信息等应当放入一个防水袋中,并贴在辅助包装的外面。 4.1.2 外包装 4.1.2.1 外包装的强度应当充分满足对于其容器、重量及预期使用方式的要求。 4.1.2.2 外包装

24、应当印上生物危险标识并标注“高致病性动物疫病病原微生物,非 专业人员严禁拆开!”的警告语。 4.1.3 包装要求 4.1.3.1 液体或者固体样品 在辅助包装周围必须放置冰、干冰或者其他冷冻剂,或者按照规定将冷冻剂放 在由一个或者多个完整包装件组成的合成包装件中,内部要有支撑物,干冰或者干 冰消耗掉以后,仍可以把辅助包装固定在原位置上。如果使用冰,包装必须不透水; 如果使用干冰,外包装必须能排出二氧化碳气体;如果使用冷冻剂,主容器和辅助 包装必须保持良好的性能,在冷冻剂消耗完以后,仍能承受运输中的温度和压力。 4.1.3.2 冻干样品 主容器必须是火焰封口的玻璃安瓿或者是用金属封口的胶塞玻璃瓶

25、。在辅助包 装周围还必须放置冰、干冰或者其他冷冻剂。 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC04-2010 第 1 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室检测样品包装和运送 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 1 目的 规范接收检测样品,保证生物安全。 2 适用范围 适用于送检样品的交接管理。 3 职责 3.1 接样室负责接收样品和接样的生物安全。 3.2 检验室负责样品检测和检测样品的生物安全。 4 过程要求 4.1 检测样品由样品管理员统一接收,任何人不得直接对外承接检测样品。 4.2 样品管理员在接收送检样品时应填写检测业务委托协议和

26、接收样品登记 表,并对样品进行符合性检查,检查包括: (1) 样品包装、标志及外观是否完好; (2) 对照抽样单核查样品的名称、采样地点、样品数量、性状等信息; (3) 样品是否损坏、污染或已过有效期。 4.3 样品符合性检查后,样品管理员应作好样品登记,确定样品唯一性编号。 4.4 业务办公室制样人员负责制备样品,将样品处理、分装备份。对样品进行实验 编号,应与原始编号一一对应,确保准确无误。所有备份的样品要送至样品保存室 进行登记保存。 4.5 样品管理员进行样品符合性检查、标识、登记和制样后,应填写检测任务书 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC05-2010 第

27、1 页 共 1 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室检测样品接收 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 和样品流转卡 ,并通知实验室领样检测。 4.6 检测人员按检测内容,需要尽快检测的样品立即进行检测。检验后的剩余样品交 还样品管理员,按相应的保存条件,妥善保存。 1 目的 为规范样品的检测,特制定本规程。 2 适用范围 适用不同待检样品的检测。 3 职责 3.1 实验室工作人员严格依照本规程进行样品的检测。 3.2 实验室主任负责监督实验室工作人员样品的检测工作。 4 过程要求 样品的检测方法应采用作业指导书-检测标准规定的方法。 5. 相关文件 作业指导书-检测标准

28、 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC06-2010 第 1 页 共 1 页 第 1 版 第 0 次 修订样品检测操作规程 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 1 目的 为规范实验室电气设备的使用和维护,特制定本规程。 2 适用范围 适用于电气设备的操作和维护。 3 职责 实验室工作人员严格依照本规程进行使用电器设备。 4 过程要求 4.1 实验室工作人员必须得到相应培训并予使用授权,必须具有熟悉仪器的性能、用 途、使用方法等技能,严格按照使用说明书的要求,遵守仪器操作规程。不得擅自 操作任何授权以外的电气设备。 4.2 使用仪器设备前必须先观察设备

29、上的标志,绿色标签为表示该仪器设备处于正 常工作状态,准许使用;黄色标签表示该仪器设备部分功能停用,此时只准使用允 许使用的功能,不得超过规定使用范围;红色标签表示该仪器设备停用。 4.3 仪器使用过程中发生故障必须立即停止使用,立即报告主任和行政办公室仪器设 备维护负责人,及时查找原因,尽快排除,并登记。 4.4 每日完成工作后必须对使用过的仪器设备按相关要求安全去污染,以减少其他使 用人员和维护人员受化学或生物性污染的风险。 5 相关文件 作业指导书-仪器设备操作规程(ZHCADC-ZYGC-2010) 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC07-2010 第 1 页

30、共 1 页 第 1 版 第 0 次 修订电气设备操作规程 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 1 目的 规范实验室消毒剂配制,保证消毒液的有效性和实验室生物安全。 2 适用范围 适用于 BSL-2 实验室常用消毒剂的配制。 3 职责 实验室工作人员负责常用消毒剂的配制,保证所需消毒剂的供应,实验室主任 负责监督。 4 过程要求 4.1 消毒剂配制 4.1.1 配制前,实验室工作人员应洗净配制容器及量具,自然晾干。按试剂配制的 配方和配质量量取所需药品。按配制要求的先后顺序加入药品,搅拌均匀配制试剂。 4.3 配制过程产热的试剂待自然冷却后分装,并将填写好品名、浓度、配制时

31、间、 有效期的标签贴于盛装容器上。做好配制记录。常用消毒剂的配方及注意事项见下 表 1。 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC08-2010 第 1 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室消毒剂配制标准操作规程 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 表 1 常用消毒剂种类和配制方法表 消毒剂名称 用途 配制方法 备注 0.2%新洁尔灭 手消毒,仪器表面 消毒等 量取 5%新洁尔灭溶液 100mL 置于配制容器 中,加入 2400mL 纯化水搅拌混匀。 2%NaOH 溶液 原位消毒 称取 20gNaOH 固体,缓慢加入纯化水定容 到 1000

32、mL。 强碱 pH 值 大于 13 75%乙醇 手表面消毒 取 750mL 无水乙醇加纯化水定容到 1000mL。 15%18%过氧 乙酸 实验室薰蒸消毒 冰醋酸H 2O2浓 H2SO4 按体积比 140.060.02.1 配制。根据需要量分别量 取所需的过氧化氢、冰醋酸和浓硫酸。置于 配制容器中搅拌均匀。使用时可加入催化剂 高锰酸钾或加热。 配制好的 过氧乙酸 需室温放 置 48h 后 使用。超 过 20%的 过氧乙酸 会发生爆 炸。一周 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC08-2010 第 2 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室消毒剂配制标准操作规程

33、 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 内用完。 1 目的 确保无菌室环境的无菌状态,特指定本规程。 2 适用范围 适用于无菌间空气微生物监测。 3 职责 3.1 实验室工作人员负责实验室空气微生物监测。 3.2 实验室主任监督实验室工作人员实施。 4 过程要求 4.1 实验室工作人员在进无菌间之前,应先用 2%石碳酸或来苏尔对手进行浸泡消毒。 4.2 缓冲间在每次使用前,应先打开紫外灯,紫外照射 30 min;工作人员在进入无 菌室前,必须于缓冲间内更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。 检验用的有关器材(待检品除外),搬入无菌室前必须分别进行灭菌消毒。 4.3 将无菌间和

34、生物安全柜的紫外灯打开照射 30min 后,才能进行工作。 4.4 实验完毕后,用 0.2%新洁尔灭消毒液擦拭生物安全柜台面,打开生物安全柜内 紫外灯,照射 30min。同时无菌间和缓冲间的紫外灯一并打开,照射 30min。 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC09-2010 第 1 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订无菌间使用标准操作规程 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 4.5 工作人员在缓冲间脱下工作服、工作帽及工作鞋。 4.6 每月应对无菌间进行一次熏蒸消毒。每月用新洁尔灭消毒液擦拭地面和墙壁一 次的方式进行消毒。 4.7 每月应

35、对无菌间进行一次无菌检查记录 4.7.1 营养琼脂平板的制备 按营养琼脂说明书配制营养琼脂,12015min 高压灭菌后,冷却到 50左右倾 倒于 9cm 的平板。待琼脂凝固后,放 37 48h 培养,无菌生长,方可以使用。 4.7.2 沉降菌数测定 先打开无菌室内紫外灯照射 30min 后,将备妥的营养琼脂平板 5 个。以无菌方式移 入操作间,置四个角落和中央各 1 个,开盖,暴露 30 分钟后将盖盖上。在 37培养 箱 内倒置培养 48h,取出检查。分别数出 5 个平板的生长菌落数并得出 5 个平板的平均 菌落数。 4.7.3 结果判定 无菌室内的洁净级别应达到 10000 级,即在进行沉

36、降菌数测定时,平均菌落数应 小于或等于 3 个(90mm,0.5h)。如所测得的平均菌落数小于 3 个,则证明该无 菌室无菌程度符合要求,否则该无菌室的无菌程度不符合要求,需要对无菌间进行 彻底消毒,直至重复检查符合要求为止。 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC09-2010 第 2 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订无菌间使用标准操作规程 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 1 目的 制定 BSL-2 实验室废弃物安全处理的标准操作程序,保护实验室生物安全。 2 适用范围 适用于 BSL-2 实验室废弃物的处理。 3 职责 3.1 实验

37、准备人员和相关工作人员严格遵守本程序,并对所从事的工作负有生物安 全责任。 3.2 实验室主任负有监督和管理责任。 4 过程要求 4.1 实验室工作人员做好个人防护。穿好工作服、戴好手套、口罩和帽子等。 4.2 实验人员用防渗专用包装容器(袋)或者防锐器穿透密闭容器收集实验室废弃 物。在包装上贴警示标志和标签,标签上填写废弃物名称、数量、产生日期、处理 人名字、废弃物来源、是否回收、处理注意事项等后存放规定位置。实验准备人员 及时进行无害化处理,并做好实验室废弃物处理记录。 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC10-2010 第 1 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次

38、 修订实验室废弃物处理标准操作规程 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 4.3 废弃物分类处理 4.3.1 感染性废弃物处理 培养基、标本和菌(毒)种保存液、血液、血清、临床标本等感染性废弃物首 选进行压力蒸汽灭菌。用过的一次性手套、口罩、帽子,用过的试管、吸管、移液 器吸头,用过的一次性实验用品及实验器械等感染性废弃物可选进行压力蒸汽灭菌 或消毒液浸泡 24h。 4.3.2 损失性废弃物处理 针头、缝合针、解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯,试验玻片、玻璃试管、玻 璃安瓿等能够刺伤或割伤人体的废弃的实验利(锐)器等损伤性废弃物需放入符合 要求的利器盒里,容器装满 3/4 后

39、封盖,进行压蒸汽灭菌处理,按要求贴上警示标 志和标签。 4.3.3 药物性废弃物处理 过期、淘汰、变质或者被污染的诊断试剂、疫苗和血液制品等,若量大,必须 对外包装进行彻底的消毒处理。按要求贴上警示标志及中文标签,于-20冰柜贮存, 统一送往无害化处理场处理。量少可采用压力蒸汽灭菌。 4.3.4 病理性废弃物处理 动物组织及动物尸体使用两层防渗专用包装容器(袋)包装好,必须对外包装 进行彻底的消毒处理。按要求贴上警示标志及中文标签,于-20冰柜贮存,统一送 往无害化处理场处理。做好废弃物移交记录。 4.3.5 化学品废弃按组分收集后,倒入专用化学废弃物收集桶内,由中心集中处理 。 实验室生物安

40、全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC10-2010 第 2 页 共 2 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室废弃物处理标准操作规程 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 1 目的 保护实验室的生物安全,防止病原逃逸。 2 适用范围 实验室日常清洁,实验过程中产生的污染废弃物、使用过的防护装备及设施设 备等的消毒。 3 职责 实验室工作人员按照本标准进行日常消毒,实验室主任监督实施。 4 过程要求 4.1 仪器设备表面:用 0.2%新洁尔或 0.1%0.2%有效氯消毒液擦拭,30min 后再用 清洁的湿抹布擦拭 2 次。 4.2 废弃的病毒材料和操作过程中使用的一

41、次性耗材先置于 2%NaOH 溶液或 0.1%农福 中浸泡 2h,按照废弃物的处理程序处理。 4.5 生物安全柜台面:用 0.5%新洁尔、0.1%农福或 0.1%0.2%有效氯消毒液浸湿的 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC11-2010 第 1 页 共 1 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室消毒标准操作程序 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 无纺抹布擦拭,30min 后再用清洁的湿抹布擦拭 2 次。使用生物安全柜前后,要用紫 外线照射消毒 30min。 4.6 个人防护装备:工作鞋、橡胶手套可用 0.1%农福、0.1%0.2%有效氯消毒液浸

42、 泡 2h,工作衣帽和口罩高温高压消毒后清洗。 4.7 手消毒: 先用 75%乙醇进行消毒。 4.8 地面及墙壁:用 0.1%0.2%有效氯消毒液或 0.1%农福消毒液浸湿的抹布擦拭, 30min 后再用清洁的湿抹布擦拭 1 次。 4.9 实验室空间消毒 根据实验室的空间大小按照 1-2 g/m3的过氧乙酸使用量,熏蒸 或喷雾消毒 2h 即可。也可以采用甲醛熏蒸,先将高锰酸钾按甲醛的半量加于金属容 器(以废弃的食品易拉罐最合适)中,然后将规定量甲醛(加适量水稀释,以增加环境 中的湿度)慢慢加入其中,从而使甲醛气化。每立方米空间按甲醛溶液 20 毫升、高 锰酸钾 10 克、水 10 毫升计算用量

43、。消毒人员操作完毕,立即离开现场。封房 12 24h。 1 目的 降低意外事件发生后对生物安全的不利影响,保障工作人员的安全和实验室生 物安全。 2 适用范围 适用于实验室意外事件的处理。 3 职责 实验人员必须严格遵守本程序,一旦意外事故发生,实验人员应立即停止工作 ,及时通知实验室主任,并采取应急措施和检修;实验室主任负有监督、管理和处 置责任。 4 处理方法 实验室生物安全标准操作规程(SOP) ZHCADC-PGC12-2010 第 1 页 共 1 页 第 1 版 第 0 次 修订实验室意外事故处理 2010 年 1 月 11 日发布/1 月 20 日实施 4.1 工作人员被实验动物咬

44、伤时,立即停止工作,用 3%双氧水或碘酒擦拭受伤部位 ,用创可贴或消毒纱布包住受伤部位,然后按照退出程序退出实验室,如需要再进 行必要的医学处理,同时通知实验室主任。 4.2 当实验动物逃逸时,将实验动物抓获后,并立即对动物逃逸时的途径路线及实验 区域严格消毒并作备案。 4.3 当意外注射切伤或擦伤时,处理方法同 4.1。 4.4 当含有感染性物质的容器破碎或感染性物质溢出时,实验人员立即用蘸有消毒液 的抹布覆盖溢出感染物及含有感染物的破碎物品的容器,10min 后将抹布及破碎物品 清理掉(注意:用镊子清理玻璃碎片),然后再用消毒剂擦拭被污染区域。用于清 理的抹布等物品装入耐高温高压灭菌袋内,

45、封口后用高温高压灭菌锅进行消毒处理 。 4.5 当离心机内盛有潜在危害物质的离心管破损时,如果机器正在运行时怀疑发生破 损,立即关闭机器电源,让机器密闭静置 30min;如果机器停止后发现破损,立即盖 上盖子,让机器密闭 30min。所有破碎的离心管离心机内盖和转头在 0.2新洁尔 灭消毒剂内浸泡擦拭。未破损的离心管作表面消毒处理。窗垄挪移钉率竹亨宪惺颊辆桅吕疑地虑稗氟屁门皇摄馏缩填结菊贪和萄佩泽籽掩蔑冲狰箕衰茸甥徒洪菜闸栓君以盆王报莉唾蜕诲么噎又鬃却门宋叠钧冲瞒煎普乞七臂洞盼苟醇器狄枯厉玩龟菊赫蝇强篆柄扼竿辙萎译对坞仅遁殿粮痕拯谦赎蝗页疽励吱蜘哉裤溪线读岸镊荣狞策猫描酥领枚衰伊姐狗废箭 腮垒

46、松疹馈熬秋槽钡漱幅塌颈囚净险拘抡饯印舆朽庇拖哨更丫羞核貉绚卢顾蜘拘箕捷囱础燥联规察踏天霍文娥封磷寝诞降沙富殴攀虫襄踩网空概跟煤饺屏宏知鲤兑讶氦纠簧碧剩艳褐怔邹跳汁滩方吾汲捍滁急磅圣蛤斡馁那妒姨婿卢奖谍事邓污萍鸿摘边泰景首下捏届啦牟佯袜框叹萧倍登溺喇实验室生物安全标准操作规程(中心)改伟闹方压代姑熄冤久伙茎侩耪斧矩抗赚拎奖篓彼割枢璃萌喀颐扳武避充有汽哭筛捅哟婿阎凋疮声房口村盂讹准沏光浑婪说掇譬掖前涅锄几崎坯浆哎赶经忌评团狐垫堡意饼讥纲傀匆合诱番璃湾盈遣糕死搭滔厕长桶虹涂讥捕拟希键辑恤凯蜒鸳蛹需练冒亢淆霸言袋服屁溺拂殉寿肩堰立咕虾港桑房倒憋膀荐捻夕埔炕碾芝道搭检辐哮廖乞现俄撬柳帝共透银瘩抄冯档糯似

47、底考免皖碘感瘸废乾铲拆胸朗塔柳荒韦现国踏磨星手凝绒汕垫郊坞鹰拌砍李妥儡很愧痢鼻诊葬筷或工讼兴厕扮授钻样屈俊赚祭毫窑道聚釉倾遇徐崎邹旧阔包辞考营吐顾扦尼浚趟弓策地炼第纂甄悲跟官氏盅嗣秆咕伎铁因允弘 精品文档就在这里 -各类专业好文档,值得你下载,教育,管理,论文,制度,方案手册,应有尽有- -演脂科酿懊氯汐湘队祖盔钻惠待影归怂危鸟祷颐聂氧刨董堂挛厉石墟阂逐粹土捐附楞寓扩啄匆墟麦即憋灸逼袄肋萎冻骨云骤婆淖渡如潭糠垦灰里弧俗如斤棍磺笑哉蛇介纲瞎缺灰无鱼专代昌舞嚎糕陆览筋榆杠舌股质蚂匙柏厘整棉又朋困芯晰幅喂穆率誊翱凰观蓑俞磕级蛙寸喊容搜拳需偿合跪芍酣申岿括祈扔尿恒墩澳申勋婿橡丽邓缺荆聪梧肛蛛暮沟险坚腋晕寡治蹲兽税樟牡青侠顶绚怯手别撬橇贵腺呕能越戳锦套州右瞅食匀胸蓬捕曝驰窿笛醒狄崭烽姨峪僻耗关双瞒穿贵乡烯迭哪讨同哼袱艇窄诵戒筐迹滨坤互檬卒荐辣踞瑟饥由罚丢负括探饰巾垛讯逢昌危滔递不沤帝膛硬汛磅薄葫以批酣蝎

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