生物技术在园林植物遗传育种改良上的应用,教师:李懿,植物原生质体培养与细胞融合,一、概念原生质体：被去掉细胞壁的具有生活力的裸露细胞。原生质体培养：将去掉了细胞壁的裸露细胞培养成植株的技术。原生质体融合（细胞融合、体细胞杂交）：将不同种、甚至属间细胞人工融合为杂种细胞，并使其再生成植株的技术。,二、原生质体培养与细胞融合的方法步骤1原生质体的制备获得大量有活力的原生质体。机械分离法酶解分离法：分离材料的准备（离体叶片、悬浮细胞等）酶解（果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶等）,2）原生质体的收集与纯化过滤离心法（沉淀法）漂浮法界面法,2原生质体的培养培养原生质体的基本营养同一般组培；对某些组分，如钙和碳源的水平要求更为严格。在培养基中保持一定的渗透压极为重要。常用的培养基有：MS培养基、N-T培养基、B5培养基等。培养方法：固体培养法；浅层液体培养法；双层培养法,3细胞融合1）原生质体融合PEG法、电融合法、高pH高浓度钙离子法、NaNO3法等；,2）杂种细胞的筛选突变细胞遗传互补选择法营养互补选择法,3）体细胞杂种植株的鉴定形态学方法、细胞学方法，分子标记法等。融合体的
