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伊红美蓝培养基.doc

.伊红美蓝培养基一、原理伊红美蓝培养基(eosin-methylene blue medium,简称EMB medium),一般用于检测大肠杆菌。 伊红为酸性染料,美篮为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有绿色金属光泽。而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落。 蛋白胨提供碳源和氮源;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;磷酸氢二钾是缓冲剂;琼脂是培养基凝固剂;伊红和美篮是抑菌剂和pH指示剂,可抑制G+,在酸性条件下产生沉淀,形成紫黑色菌落或具黑色中心的外围无色透明的菌落。二、鉴定方法制作伊红美蓝培养基,趁热注入培养皿中,凝成平板,待用。 用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水,按1:10稀释。 取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上。用平板划线分离法进行分离。 将划线后的培养皿倒置37温箱中培养1824小时。培养基中会出现大肠杆菌菌落,菌落中心呈暗紫黑色,发金属光泽。 将菌落接种于斜面培养基上(由营养琼脂培养基制成)。三、配方蛋白胨 10g 乳糖

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