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培养基的配制及灭菌.doc

.培养基的配制及灭菌一 实验目的1. 三角瓶,培养皿,试剂瓶,试管,枪尖盒等仪器的清洗。2. 三角瓶棉塞的制作,三角瓶,吸管,培养皿,试剂瓶,试管,枪尖盒的包装与灭菌。3. 高温蒸汽灭菌原理的学习。4. LB和MacConkey培养基的制作与灭菌。二 实验原理1. 高温灭菌的原理:由于培养基配置过程中并非是无菌操作,所以要通过立即灭菌来防止配制过程中混入的杂菌利用培养基中的营养物质进行繁殖从而破坏培养基的性能。高压蒸汽灭菌是生物试验应用最广,效果最好的一种湿热灭菌法。在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。注意:使用高压蒸汽灭菌前一定要完全排除锅内空气,使锅内全部是水蒸气,灭菌才能彻底。否则在同一压力下,锅内实际温度和理想温度就会有差距,不能达到最好灭菌效果。在使用灭菌锅前切勿忘记加水,水加至与三角搁架相平,以防灭菌锅烧干而引起炸裂事故。使用完后要等到压力降为零再打开锅盖,否则

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