第九章 色谱法和高效液相色谱法,本章内容,第九章 色谱法和高效液相色谱法,第一节 各种色谱法介绍,一、色谱法原理:利用样品组分两相间(固定相与流动相)进行分配。流动相带着样品流经固定相,样品与固定相作用,样品组分性质差异,作用大小不同,在固定相滞留时间不同。,二、纸色谱 原理:以纸作为惰性支持物,纸纤维上OH具有亲水性吸附一层水作为固定相,有机溶剂作为流动相。 操作: 滤纸一端点样品,干后放于容器,纸饱和了溶剂蒸汽后,使溶剂从样品端经毛细作用流向另一端,样品组分分离。,三、薄层色谱(TLC) 原理:将吸附剂(硅胶、氧化铝)涂布于玻璃板,铺成薄层板,溶剂展开。 操作: 薄层板制备 薄层板活化 点样 展开 定性 定量,高效液相色谱法原理:用高压泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂缓冲液流动相泵入装有固定相的色谱柱,经进样阀注入待测物,由流动相带入柱内,由于样品组分物理化学性质不同,在固定相和流动相分配系数不同,在柱内分离,不易被固定相滞留先出柱,被固定相滞留时间长后出柱,样品组分进入检测器检测信号记录。,第二节 高效液相色谱法,装置,高效液相色谱分离模式