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菠菜叶片叶绿体的提取实验设计.doc

.菠菜叶片叶绿体的提取一、实验目的:用简单的方法制备完整的叶绿体,且使得叶绿体的获得率较高。通过植物细胞叶绿体的分离,了解细胞器分离的一般原理与方法。了解差速离心特点与用途。二、实验原理: 将组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法,一个颗粒在离心中的沉降速率取决颗粒的大小、形状和密度,也同离心力以及悬浮介质的粘度有。在一给定的离心中,同一时间内,密度和大小不同的颗粒其沉降速度不同。依次增加离心力和离心时间,就能够使非均一悬浮中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部,分批收集即可获得各种亚细胞组分,即为差速离心法。叶绿体的分离应在等渗溶液(0.35mol/L氯化钠或0.4mol/L蔗糖溶液)中进行,以免渗透压的改变使叶绿受到损伤。将匀浆液在1500r/min的条件下离心5min,以去除其中的组织残渣和一些未被破碎的完整细胞。然后,在3500r/min的条件下离心510in,即可获得沉淀的叶绿。三、实验对象:提取新鲜的菠菜叶片的叶绿体。四、实验条件:实验材料:新鲜的菠菜叶片,一般选取刚见太阳不久的菠菜叶,以叶片挺厚嫩为佳

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