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2021细胞培养实验技术手册.docx

细胞培养实验技术手册实验记录24/2/2021一、细胞培养一、培养基的配制a. RPMI 1640 1(with L-glutamine)类培养基组分:RPMI ,10%FBS(胎牛血清),双抗生素(penicillin,盘尼西林(青霉素),streptomycin,链霉素);配制方法:500 ml RPMI(一瓶) + 50 ml FBS + 5 ml 双抗生素b. DMEM 1类培养基组分:DEMI,10% FBS,双抗生素;配制方法:500 ml DMEM(一瓶) + 50 ml FBS + 5 ml 双抗生素二、培养细胞RNA的提取1.从培养箱中拿出6孔板(每孔培养2 ml),吸出培养液;2.PBS清洗;用大枪管吸取PBS加进每个培养孔中(枪头不要触碰培养板,防止交叉污染),用1 ml枪吹匀清洗(把培养板倾斜,吸溶液指最高处打出)。重复以上操作一次。3. 每孔中加1 ml Trizol ,吸出放-80冰箱冷冻。三、培养细胞DNA的提取1.从培养箱中拿出6孔板(每孔培养2 ml),吸出培养液;2.PBS清洗;用大枪

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