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ELISA基本步骤和主要试剂、材料注意：本步骤为间接ELISA步骤一 主要步骤1 包被取所要包被的物质，提前设计好所需浓度，根据包被孔数计算所需包被物的量，用包被液稀释至所需体积，分加至各孔中。包被条件：两种选择：一是将ELISA板直接置4过夜；也可以先置37孵育2小时再转入4过夜。2 洗涤 包被结束后弃掉包被液，用PBST进行洗涤，方法为PBST加满每孔，静置5-10min，弃掉洗液，重新加满，重复洗涤3-5次，最后拍干ELISA板等待下一步封闭。3 封闭常用10%小牛血清，取第2步的ELISA板加封闭液至每孔，体积至少为所加包被液的两倍。封闭条件也有两种选择：直接置于4过夜，或者置于37温育2-4h，具体何种条件不同物质的ELISA可能不同。4 洗涤封闭结束的ELISA板进行洗涤，方法同步骤2。最后拍干等待加入一抗。5 加入一抗一抗即为你要检测的物质，一般加之前需要稀释，具体稀释倍数不同实验 不同需要自己摸索。一抗样品一般用包被液稀释，稀释到所需浓度后加入到相应孔中。反应条件为37孵育2h。6 洗涤具体同
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