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噬菌体分离(共2页).doc

变形杆菌(大肠杆菌)噬菌体生理特性研究1.变形杆菌、大肠杆菌的纯化划线分离纯化2. 变形杆菌噬菌体、大肠杆菌噬菌体分离器材:菌种:变形杆菌、大肠杆菌噬菌体样品:阴沟污水(100ml),土壤培养基:3倍牛肉膏蛋白胨培养液(4瓶,每瓶50ml),牛肉膏培养液,牛肉膏蛋白胨半固体培养基(倒上层用),牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(倒底层用)仪器:离心机,细菌滤器,抽滤装置,恒温水浴锅,无菌涂布器,无菌吸管等步骤:a.培养大肠杆菌至对数期600nm(OD值0.8左右)b.增殖噬菌体样品:取上述大肠杆菌培养液6ml于盛有50ml 3倍牛肉膏蛋白胨培养液的三角瓶内,后加入污水样100ml(离心并过滤除菌),继续37摇床振荡培养12-14h,以增殖噬菌体。c.制备裂解液:将以上培养液3000r/min离心30min,将上清液过滤除菌,取100ml滤液及5ml大肠杆菌液加入50ml 3倍牛肉膏蛋白胨培养液中,37培养12-18h进行噬菌体富集。d.将以上富集液3000r/min离心30min后,取上清液10mL加入 5mL 3倍牛肉膏蛋白胨培养液及

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