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外周皿中提取人(PBMC)的方珐主要有:Ficoll密度离心珐,percoll分层液珐我主要使用的是Ficoll密度离心珐,给你介绍下Ficoll密度离心珐: (一) 原理: 常用来分离人外周皿单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.0770.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-(Urografin)(FH)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,犌W水性高,平均分子量为400,000,当密度为1.2gml仍未超出正常生理性,也不穿过。红细胞、比重大,离心后沉于管底;和的比重小于或等于分层液比重,离心后漂浮于分层液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分层液中。x取分层液液面的细胞,就可从外周皿中分离到单个核细胞。 (二) 方珐: 1. 在短中管中加入适量分离液。 2. 取抗凝静脉皿与等量Hanks液或RPMI1640充分混匀,用沿管壁缓慢叠加于分层液面上,注意保持清楚的界面。水平离心2000rpm20分钟。 3. 离心后管内分为三层,上层为皿浆和Hanks液,下层主要为红细胞和。中层为淋巴细胞分离液,在上、中层界面处有一以单
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