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感受态细胞的制备方法1、 感受态定义、作用、常用制备方法及原理2、 感受态细胞不好用的原因3、 影响转化效率的原因4、 为何要低温环境制备1.感受态定义：细胞能够从周围环境中摄取DNA分子，并且不易被细胞内的限制性核酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态称感受态（competence）。作用：如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA。感受态的目的是增加细胞的通透性，以便外源基因进入宿主细胞，实现转化的目的。优点是细胞膜通透性增大，方便大分子的进入。意义是实验转移外源DNA分子进入受体细胞，完成实验。常用制备方法：细菌感受态少量制备法（CaCl2法）、细菌感受态大量制备法、细菌电转化法等详见基因工程实验指导p153-157.2.感受态细胞做得不好的原因一菌液OD值偏大或偏小二原始菌株不好三试剂超纯程度不够四操作时对菌体伤害过大3.影响转化效率的原因1细菌的生长状态：实验中应密切注视细菌的生长状态和密度,尽量使用对数生长期的细胞（一般通过检测OD600来控制.DH5菌株OD
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