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感受态细胞的制备步骤和原理实验目的 为了获得大量的质粒作为克隆载体，我们需要将购买来的质粒通过转化的方法导入细菌的细胞内。制备出感受态的细胞，我们就可以方便的将需克隆的质粒导入其中，使其繁殖，就能获得大量质粒。本次实验的目的就是增加质粒的数量。同时，我们能掌握大肠杆菌感受态细胞的制备及转化的基本原理和实验技术方法。实验原理及过程实验步骤1挑取一个JM109单菌落于3ml LB(无抗生素)培养基中，37，180rpm培养过夜。让菌复苏，进入对数期的早中期。此时更容易制得感受态细胞。2取0.4mL过夜培养物加入到40mL LB(无抗生素)培养基中，37250rpm大约2.5小时。 减少达到所需亮的均所需繁殖的世代数，以减少菌的变异。3取培养物置于40mL的灭菌离心管中，冰浴10min，4000rpm 4离心10min，弃上清。（将所有上清倒光，可以将离心管倒过来） 使细菌的生长停止，代谢减慢。因为这时已经没有培养基了，如果细菌仍有很高的代谢效率，则有大量细菌死亡。4菌体重悬于10mL 100mmol/L冰冷CaCl2
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