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基因工程实验报告姓名:杜琳颖 学号:2017051141 学院:生命科学院 专业:生化与分子1、 实验目的学习并掌握从目的基因克隆到蛋白质表达的实验流程及原理。2、 实验流程实验一、质粒提取载体DNA提取及酶切鉴定1、 实验目的学习质粒的酶切及电泳分析。2、 实验原理质粒是一种染色体外的稳定遗传因子,具有双链闭环结构的 DNA 分子。它具有自主复制能力,能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数,可表达它携带的遗传信息。目前,经人工改造的质粒已广泛用作基因工程中目的基因的运载工具载体。质粒 DNA 的提取是依据质粒DNA 分子较染色体DNA 分子小,且具有超螺旋共价闭合环状的特点,从而将质粒DNA 与大肠杆菌染色体DNA 分离。现在常用的方法有:碱裂解法、密度梯度离心法、煮沸裂解法等。实验室普遍采用的碱裂解法具有操作简便、快速、得率高的优点。其主要原理:利用染色体DNA 与质粒DNA 的变性与复性的差异而达到分离的目的。在碱变性条件下,染色体DNA 的氢键断裂,双螺旋解开而变性,质粒DNA 氢键也大部分断裂,双螺旋
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