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抗坏血酸含量测定(分光光度计法)3页.doc

植物生理学模块实验指导李玲 主编科学出版社一、 维生素C含量的测定方法(分光光度计法)【实验目的】学习利用分光光度计法测定维生素C(抗坏血酸)含量的原理和方法。【实验原理】维生素C(抗坏血酸)具有较强的还原力,可以把铁离子(Fe3+)还原成亚铁离子(Fe2+),亚铁离子与红菲啰啉(4,7-二苯基-1,10-菲啰啉,BP)反应形成红色螯合物。此化合物在波长534nm处具有强的吸收峰,且吸光度与反应液中抗坏血酸含量呈正相关。因此,可用比色法来测定抗坏血酸含量。【器材与试剂】1. 实验仪器与用具离心机、分光光度计、研钵、电子天平、容量瓶(50ml和100ml)、漏斗、滤纸、离心管、试管。2. 实验试剂50g/L三氯乙酸(TCA)溶液:称取5g三氯乙酸(分析纯),用蒸馏水溶解,稀释至100ml。0.4%磷酸-乙醇溶液:量取0.47ml 85%磷酸溶液加入到无水乙醇中,并用无水乙醇稀释至100ml。5g/L BP-乙醇溶液:称取0.25g BP(纯度97%)加入到无水乙醇中溶解,并用无水乙醇稀释至50ml。0.3g/L FeCl3

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