常染色体隐性遗传性耳聋59蛋白ELISA试剂盒说明书.DOC

1、常染色体隐性遗传性耳聋 59 蛋白 ELISA 试剂盒说明书本试剂仅供研究使用 标本：体液常染色体隐性遗传性耳聋 59 蛋白 ELISA 试剂盒说明书试验原理：BFGF试剂盒是固相 夹心法酶联 免疫吸附实验（ELISA）.已知 BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将 BFGF 和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子 ELISA 检测试剂 盒洗涤后，加入 亲和素标记过的 HRP。再经过 温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物 A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜 色的深浅和样品中 BFGF 的浓度呈比例关系。常染色体隐性遗传性耳聋 59 蛋白

2、 ELISA 试剂盒说明书自备材料1蒸 馏 水。2加 样 器：5ul 、 10ul、50ul、100ul 、200 、500ul、1000ul。3振 荡 器及磁力 搅拌器等。安全性1避免直接接触 终止液和底物 A、B。一旦接触到这些液体， 请尽快用水冲洗。2 实验 中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3不要用嘴吸取 试剂盒里的任何成份。常染色体隐性遗传性耳聋 59 蛋白 ELISA 试剂盒说明书操作注意事 项1 试剂应按标签储 存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2 实验 中不用的板条 应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3不用的其它试剂应 包装好或盖好。不同批号的试剂不要混

3、用。保质前使用。4使用一次性的吸 头以免交叉 污染，吸取终止液和底物 A、B 液时，避免使用带金属部分的加样器。5使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6洗 涤酶标 板时应 充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7底物 A应挥发，避免长时间打开盖子。底物 B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取 OD值。8加入试剂的顺 序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9按照中标明的 时间、加液的量及顺序进行温育操作。常染色体隐性遗传性耳聋 59 蛋白 ELISA 试剂盒说明书样 品收集、处理及保存方法1、血清- 操作 过程

4、中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000g 离心 10 分 钟将血清和 红细胞迅速小心地分离。2、血 浆 -EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000g 离心 30 分钟去除颗粒。3、 细 胞上清液 -1000g 离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。4、保存-如果样品不立即使用， 应将其分成小部分-70 保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在 37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2洗 涤缓

5、冲液（ 50）的稀释：蒸馏水 50 倍稀释。常染色体隐性遗传性耳聋 59 蛋白 ELISA 试剂盒说明书操作步 骤1使用前，将所有 试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2根据待测样品数量加上 标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3加入稀释好后的 标准品 50ul 于反应孔、加入待测样品 50ul 于反应孔内。立即加入 50ul 的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37温育 1 小时。4甩去孔内液体，每孔加 满洗 涤液，振荡 30 秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复

6、此操作 3 次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5每孔加入 80ul 的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37温育 30 分钟。6甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡 30 秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作 3 次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7每孔加入底物 A、B 各 50ul，轻轻振荡混匀，37温育 10 分钟。避免光照。8取出酶标板，迅速加入 50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9在 450nm 波长处测定各孔的 OD值。局限6 号 标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。常染色体隐性遗传性耳聋 59 蛋白 ELISA 试剂盒说明书性能1.

7、 灵敏度：最小的 检测浓度小于 1 号标准品。稀释度的线性。 样品线性回归与预期浓度相关系数 R值为 0.990。2. 特异性：不与其它细胞因子反应。3. 重复性：板内、板间变异系数均小于 10%。常染色体隐性遗传性耳聋 59 蛋白 ELISA 试剂盒说明书结果判断与分析1、 仪 器 值：于波 长 450nm 的酶标仪上读取各孔的 OD值2、以吸光度 OD值为纵坐标（Y ），相应的 BFGF标准品浓度为 横坐标（X ），做得相应的曲线，样品的 BFGF 含量可根据其 OD值由标准曲线换算出相应的 浓度。3、检测值范围： 0-800pg/ml4、敏感度： 1.0 pg/mlPAI-1 兔子纤溶酶

8、原激活物抑制因子 1 规格： 48T/96TPAI 兔子纤溶酶原激活物抑制因子 规格： 48T/96TICAM-3/CD50 兔子细胞间粘附分子 3 规格： 48T/96TICAM-2/CD102 兔子细胞间粘附分子 2 规格： 48T/96TICAM-1/CD54 兔子细胞间粘附分子 1 规格： 48T/96TDPD 兔子脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉 规格： 48T/96TDHEA-S 兔子脱氢表雄酮硫酸酯 规格： 48T/96THA 兔子透明质酸 规格： 48T/96TMBP 兔子髓磷脂碱性蛋白 规格： 48T/96TRBP-4 兔子视黄醇结合蛋白 4 规格： 48T/96TGHRP 兔子生长激

9、素释放多肽 规格： 48T/96TADM 兔子肾上腺髓质素 规格： 48T/96TNT-4 兔子神经营养因子 4 规格： 48T/96TNT-3 兔子神经营养因子 3 规格： 48T/96TNSE 兔子神经特异性烯醇化酶 规格： 48T/96TNGF 兔子神经生长因子 规格： 48T/96TGFAP 兔子神经胶质纤维酸性蛋白 规格： 48T/96TPGE2 兔子前列腺素 E2 规格： 48T/96TPGE1 兔子前列腺素 E1 规格： 48T/96TGIP 兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽 规格： 48T/96TCORT 兔子皮质酮/肾上腺酮 规格： 48T/96TCortisol 兔子皮质醇

10、规格： 48T/96TF 兔子凝血因子 规格： 48T/96TTR 兔子凝血酶受体 规格： 48T/96TBNP 兔子脑钠素/脑钠尿肽 规格： 48T/96TES 兔子内皮抑素 规格： 48T/96TeNOS-3 兔子内皮型一氧化氮合成酶 3 规格： 48T/96TET-1 兔子内皮素 1 规格： 48T/96TET-1 兔子内皮素 1 规格： 48T/96TIgM 兔子免疫球蛋白 M 规格： 48T/96TIgG 兔子免疫球蛋白 G 规格： 48T/96TIgE 兔子免疫球蛋白 E 规格： 48T/96TIgA 兔子免疫球蛋白 A 规格： 48T/96TSam 兔子可溶性粘附分子 规格： 4

11、8T/96TsVCAM-1 兔子可溶性血管细胞粘附分子 1 规格： 48T/96TsEPCR 兔子可溶性血管内皮细胞蛋白 C 受体 规格： 48T/96TsICAM-1 兔子可溶性细胞间粘附分子 1 规格： 48T/96TsCD40L 兔子可溶性白细胞分化抗原 40 配体 规格： 48T/96TsP-selectin 兔子可溶性 P选择 素 规格： 48T/96TsE-selectin 兔子可溶性 E选择 素 规格： 48T/96TANGA 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体 规格： 48T/96TMIP-5 兔子巨噬细胞炎性蛋白 5 规格： 48T/96TMIP-1/CCL3 兔子巨噬细胞炎性蛋白 1

12、 规格： 48T/96TCollagenase II 兔子胶原酶 II 规格： 48T/96TCollagenase I 兔子胶原酶 I 规格： 48T/96TbFGF 兔子碱性成纤维细胞生长因子 规格： 48T/96TT4 兔子甲状腺素 规格： 48T/96TTIMP-1 兔子基质金属蛋白酶抑制因子 1 规格： 48T/96TMMP-9 兔子基质金属蛋白酶 9 规格： 48T/96TMMP-5 兔子基质金属蛋白酶 5 规格： 48T/96TMMP-4 兔子基质金属蛋白酶 4 规格： 48T/96TMMP-3 兔子基质金属蛋白酶 3 规格： 48T/96TCr 兔子骨胶原交联 规格： 48T/

13、96TT 兔子睾酮 规格： 48T/96THGF 兔子肝细胞生长因子 规格： 48T/96TTE 兔子端粒酶 规格： 48T/96TCETP 兔子胆固醇酯转移蛋白 规格： 48T/96TMCP-1/CCL2/MCAF 兔子单核细胞趋化蛋白 1 规格： 48T/96TPRL 兔子催乳素 规格： 48T/96TPRL 兔子催乳素 规格： 48T/96TACTH 兔子促肾上腺皮质激素 规格： 48T/96TFSH 兔子促卵泡素 规格： 48T/96TTSH 兔子促甲状腺素 规格： 48T/96TLH 兔子促黄体激素 规格： 48T/96TLH 兔子促黄体激素 规格： 48T/96TE2 兔子雌二醇

14、规格： 48T/96TiFABP 兔子肠脂肪酸结合蛋白 规格： 48T/96TC3a 兔子补体片断 3a 规格： 48T/96TC4 兔子补体蛋白 4 规格： 48T/96TEGF 兔子表皮生长因子 规格： 48T/96TLIFR 兔子白血病抑制因子受体 规格： 48T/96TLTB4 兔子白三烯 B4 规格： 48T/96TIL-4 兔子白介素 4 规格： 48T/96TIL-3 兔子白介素 3 规格： 48T/96TIL-2 兔子白介素 2 规格： 48T/96TIL-1sR 兔子白介素 1 可溶性受体 I 规格： 48T/96TIL-1 兔子白介素 1 规格： 48T/96TIL-10

15、兔子白介素 10 规格： 48T/96TIL-1 兔子白介素 1 规格： 48T/96TIFN- 兔子 干扰素 规格： 48T/96T-TG 兔子 血小板球蛋白/ 血栓环蛋白 规格： 48T/96TIFN- 兔子 干扰素 规格： 48T/96TS-100 兔子 S100 蛋白 规格： 48T/96TS-100B 兔子 S100B 蛋白 规格： 48T/96TE-Selectin/CD62E 兔子 E选择 素 规格： 48T/96TD2D 兔子 D 二聚体 规格： 48T/96TCRP 兔子 C 反应蛋白 规格： 48T/96TBcl-2 兔子 B细胞淋巴瘤因子 2 规格： 48T/96TPNP

16、 兔子型前胶原肽 规格： 48T/96TPNT 兔子型前胶原氨基端肽 规格： 48T/96TCol 兔子型胶原 规格： 48T/96TCol 兔子型胶原 规格： 48T/96TPCP 兔子型前胶原羧基端肽 规格： 48T/96TCol 兔子型胶原 规格： 48T/96TTGF2 兔转化生长因子 2 规格： 48T/96TMHC/RLA 兔主要组织相容性复合体类 规格： 48T/96TMHC/RLA 兔主要组织相容性复合体类 规格： 48T/96TLp- 兔脂蛋白 规格： 48T/96TApo-E 兔载脂蛋白 E 规格： 48T/96Tapo-B100 兔载脂蛋白 B100 规格： 48T/96Tapo-A1 兔载脂蛋白 A1 规格： 48T/96TiNOS 兔诱导型一氧化氮合成酶 规格： 48T/96TOSM 兔抑瘤素 M 规格： 48T/96TAChRab 兔乙酰胆碱受体抗体 规格： 48T/96TACh 兔乙酰胆碱 规格： 48T/96T