高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书.DOC

1、高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)ELISA 试剂盒说明书本试剂仅供研究使用 标本：体液高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)ELISA 试剂盒说明书试验原理：BFGF试剂盒是固相 夹心法酶联 免疫吸附实验（ELISA）.已知 BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将 BFGF 和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子 ELISA 检测试剂 盒洗涤后，加入 亲和素标记过的 HRP。再经过 温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物 A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜 色的深浅和样品中 BFGF 的浓度呈比例关系。高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1

2、)ELISA 试剂盒说明书自备材料1蒸 馏 水。2加 样 器：5ul 、 10ul、50ul、100ul 、200 、500ul、1000ul。3振 荡 器及磁力 搅拌器等。安全性1避免直接接触 终止液和底物 A、B。一旦接触到这些液体， 请尽快用水冲洗。2 实验 中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3不要用嘴吸取 试剂盒里的任何成份。高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)ELISA 试剂盒说明书操作注意事项1 试剂应按标签储 存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2 实验 中不用的板条 应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3不用的其它试剂应 包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用

3、。保质前使用。4使用一次性的吸 头以免交叉 污染，吸取终止液和底物 A、B 液时，避免使用带金属部分的加样器。5使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6洗 涤酶标 板时应 充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7底物 A应挥发，避免长时间打开盖子。底物 B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取 OD值。8加入试剂的顺 序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9按照中标明的 时间、加液的量及顺序进行温育操作。高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)ELISA 试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清- 操作 过程中避

4、免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000g 离心 10 分 钟将血清和 红细胞迅速小心地分离。2、血 浆 -EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000g 离心 30 分钟去除颗粒。3、 细 胞上清液 -1000g 离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。4、保存-如果样品不立即使用， 应将其分成小部分-70 保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在 37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2洗 涤缓 冲液

5、（ 50）的稀释：蒸馏水 50 倍稀释。高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)ELISA 试剂盒说明书操作步骤1使用前，将所有 试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2根据待测样品数量加上 标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3加入稀释好后的 标准品 50ul 于反应孔、加入待测样品 50ul 于反应孔内。立即加入 50ul 的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37温育 1 小时。4甩去孔内液体，每孔加 满洗 涤液，振荡 30 秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作

6、 3 次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5每孔加入 80ul 的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37温育 30 分钟。6甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡 30 秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作 3 次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7每孔加入底物 A、B 各 50ul，轻轻振荡混匀，37温育 10 分钟。避免光照。8取出酶标板，迅速加入 50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9在 450nm 波长处测定各孔的 OD值。局限6 号 标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)ELISA 试剂盒说明书性能1. 灵敏

7、度：最小的 检测浓度小于 1 号标准品。稀释度的线性。 样品线性回归与预期浓度相关系数 R值为 0.990。2. 特异性：不与其它细胞因子反应。3. 重复性：板内、板间变异系数均小于 10%。高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)ELISA 试剂盒说明书结果判断与分析1、 仪 器 值：于波 长 450nm 的酶标仪上读取各孔的 OD值2、以吸光度 OD值为纵坐标（Y ），相应的 BFGF标准品浓度为 横坐标（X ），做得相应的曲线，样品的 BFGF 含量可根据其 OD值由标准曲线换算出相应的 浓度。3、检测值范围： 0-800pg/ml4、敏感度： 1.0 pg/mlFDP 兔子血纤蛋白原降解产

8、物 规格： 48T/96TTM 兔子血栓调节蛋白 规格： 48T/96TPAI-1 兔子纤溶酶原激活物抑制因子 1 规格： 48T/96TPAI 兔子纤溶酶原激活物抑制因子 规格： 48T/96TICAM-3/CD50 兔子细胞间粘附分子 3 规格： 48T/96TICAM-2/CD102 兔子细胞间粘附分子 2 规格： 48T/96TICAM-1/CD54 兔子细胞间粘附分子 1 规格： 48T/96TDPD 兔子脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉 规格： 48T/96TDHEA-S 兔子脱氢表雄酮硫酸酯 规格： 48T/96THA 兔子透明质酸 规格： 48T/96TMBP 兔子髓磷脂碱性蛋白 规格：

9、 48T/96TRBP-4 兔子视黄醇结合蛋白 4 规格： 48T/96TGHRP 兔子生长激素释放多肽 规格： 48T/96TADM 兔子肾上腺髓质素 规格： 48T/96TNT-4 兔子神经营养因子 4 规格： 48T/96TNT-3 兔子神经营养因子 3 规格： 48T/96TNSE 兔子神经特异性烯醇化酶 规格： 48T/96TNGF 兔子神经生长因子 规格： 48T/96TGFAP 兔子神经胶质纤维酸性蛋白 规格： 48T/96TPGE2 兔子前列腺素 E2 规格： 48T/96TPGE1 兔子前列腺素 E1 规格： 48T/96TGIP 兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽 规格： 48

10、T/96TCORT 兔子皮质酮/肾上腺酮 规格： 48T/96TCortisol 兔子皮质醇 规格： 48T/96TF 兔子凝血因子 规格： 48T/96TTR 兔子凝血酶受体 规格： 48T/96TBNP 兔子脑钠素/脑钠尿肽 规格： 48T/96TES 兔子内皮抑素 规格： 48T/96TeNOS-3 兔子内皮型一氧化氮合成酶 3 规格： 48T/96TET-1 兔子内皮素 1 规格： 48T/96TET-1 兔子内皮素 1 规格： 48T/96TIgM 兔子免疫球蛋白 M 规格： 48T/96TIgG 兔子免疫球蛋白 G 规格： 48T/96TIgE 兔子免疫球蛋白 E 规格： 48T/

11、96TIgA 兔子免疫球蛋白 A 规格： 48T/96TSam 兔子可溶性粘附分子 规格： 48T/96TsVCAM-1 兔子可溶性血管细胞粘附分子 1 规格： 48T/96TsEPCR 兔子可溶性血管内皮细胞蛋白 C 受体 规格： 48T/96TsICAM-1 兔子可溶性细胞间粘附分子 1 规格： 48T/96TsCD40L 兔子可溶性白细胞分化抗原 40 配体 规格： 48T/96TsP-selectin 兔子可溶性 P选择 素 规格： 48T/96TsE-selectin 兔子可溶性 E选择 素 规格： 48T/96TANGA 兔子抗中性粒细胞颗粒抗体 规格： 48T/96TMIP-5

12、兔子巨噬细胞炎性蛋白 5 规格： 48T/96TMIP-1/CCL3 兔子巨噬细胞炎性蛋白 1 规格： 48T/96TCollagenase II 兔子胶原酶 II 规格： 48T/96TCollagenase I 兔子胶原酶 I 规格： 48T/96TbFGF 兔子碱性成纤维细胞生长因子 规格： 48T/96TT4 兔子甲状腺素 规格： 48T/96TTIMP-1 兔子基质金属蛋白酶抑制因子 1 规格： 48T/96TMMP-9 兔子基质金属蛋白酶 9 规格： 48T/96TMMP-5 兔子基质金属蛋白酶 5 规格： 48T/96TMMP-4 兔子基质金属蛋白酶 4 规格： 48T/96TM

13、MP-3 兔子基质金属蛋白酶 3 规格： 48T/96TCr 兔子骨胶原交联 规格： 48T/96TT 兔子睾酮 规格： 48T/96THGF 兔子肝细胞生长因子 规格： 48T/96TTE 兔子端粒酶 规格： 48T/96TCETP 兔子胆固醇酯转移蛋白 规格： 48T/96TMCP-1/CCL2/MCAF 兔子单核细胞趋化蛋白 1 规格： 48T/96TPRL 兔子催乳素 规格： 48T/96TPRL 兔子催乳素 规格： 48T/96TACTH 兔子促肾上腺皮质激素 规格： 48T/96TFSH 兔子促卵泡素 规格： 48T/96TTSH 兔子促甲状腺素 规格： 48T/96TLH 兔子促

14、黄体激素 规格： 48T/96TLH 兔子促黄体激素 规格： 48T/96TE2 兔子雌二醇 规格： 48T/96TiFABP 兔子肠脂肪酸结合蛋白 规格： 48T/96TC3a 兔子补体片断 3a 规格： 48T/96TC4 兔子补体蛋白 4 规格： 48T/96TEGF 兔子表皮生长因子 规格： 48T/96TLIFR 兔子白血病抑制因子受体 规格： 48T/96TLTB4 兔子白三烯 B4 规格： 48T/96TIL-4 兔子白介素 4 规格： 48T/96TIL-3 兔子白介素 3 规格： 48T/96TIL-2 兔子白介素 2 规格： 48T/96TIL-1sR 兔子白介素 1 可溶

15、性受体 I 规格： 48T/96TIL-1 兔子白介素 1 规格： 48T/96TIL-10 兔子白介素 10 规格： 48T/96TIL-1 兔子白介素 1 规格： 48T/96TIFN- 兔子 干扰素 规格： 48T/96T-TG 兔子 血小板球蛋白/ 血栓环蛋白 规格： 48T/96TIFN- 兔子 干扰素 规格： 48T/96TS-100 兔子 S100 蛋白 规格： 48T/96TS-100B 兔子 S100B 蛋白 规格： 48T/96TE-Selectin/CD62E 兔子 E选择 素 规格： 48T/96TD2D 兔子 D 二聚体 规格： 48T/96TCRP 兔子 C 反应蛋

16、白 规格： 48T/96TBcl-2 兔子 B细胞淋巴瘤因子 2 规格： 48T/96TPNP 兔子型前胶原肽 规格： 48T/96TPNT 兔子型前胶原氨基端肽 规格： 48T/96TCol 兔子型胶原 规格： 48T/96TCol 兔子型胶原 规格： 48T/96TPCP 兔子型前胶原羧基端肽 规格： 48T/96TCol 兔子型胶原 规格： 48T/96TTGF2 兔转化生长因子 2 规格： 48T/96TMHC/RLA 兔主要组织相容性复合体类 规格： 48T/96TMHC/RLA 兔主要组织相容性复合体类 规格： 48T/96TLp- 兔脂蛋白 规格： 48T/96TApo-E 兔载

17、脂蛋白 E 规格： 48T/96Tapo-B100 兔载脂蛋白 B100 规格： 48T/96Tapo-A1 兔载脂蛋白 A1 规格： 48T/96TiNOS 兔诱导型一氧化氮合成酶 规格： 48T/96TOSM 兔抑瘤素 M 规格： 48T/96TAChRab 兔乙酰胆碱受体抗体 规格： 48T/96TACh 兔乙酰胆碱 规格： 48T/96TNOS 兔一氧化氮合成酶 规格： 48T/96TOLAb 兔氧化低密度脂蛋白抗体 规格： 48T/96TFbg 兔血纤蛋白原 规格： 48T/96TTXB2 兔血栓素 B2 规格： 48T/96TCH50 兔血清总补体 规格： 48T/96TNO 兔血

18、清一氧化氮 规格： 48T/96TGMP-140 兔血浆 颗粒膜蛋白 规格： 48T/96TVWF 兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子 规格： 48T/96TANG-2 兔血管生成素 2 规格： 48T/96TVCAM-1/CD106 兔血管内皮细胞粘附分子 1 规格： 48T/96TVEGF 兔血管内皮细胞生长因子 规格： 48T/96TANG- 兔血管紧张素 规格： 48T/96TcTnT 兔心肌特异性肌钙蛋白 T 规格： 48T/96TcTn- 兔心肌肌钙蛋白 规格： 48T/96TTAFI 兔纤溶抑制因子 规格： 48T/96TPAP 兔纤溶酶抗纤溶酶复合物 规格： 48T/96TG

19、HbA1c 兔糖化血红蛋白 A1c 规格： 48T/96TRenin 兔肾素 规格： 48T/96TPEDF 兔色素上皮衍生因子 规格： 48T/96TLF/LTF 兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白 规格： 48T/96TLZM 兔溶菌酶 规格： 48T/96THSP-90 兔热休克蛋白 90 规格： 48T/96THSP-70 兔热休克蛋白 70 规格： 48T/96THSP-40 兔热休克蛋白 40 规格： 48T/96THSP-20 兔热休克蛋白 20 规格： 48T/96TNA 兔去甲肾上腺素 规格： 48T/96TF1+2 兔凝血酶原片段 F1+2 规格： 48T/96TPLAUR/uPAR

20、 兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体 规格： 48T/96TuPA 兔尿激酶型纤溶酶原激活物 规格： 48T/96TeNOS 兔内皮型一氧化氮合成酶 规格： 48T/96TLFA-3/CD58 兔淋巴细胞功能相关抗原 3 规格： 48T/96TsFAS/Apo-1 兔可溶性凋亡相关因子 规格： 48T/96TGP 兔抗糖蛋白抗体 规格： 48T/96TASMA 兔抗平滑肌抗体 规格： 48T/96TABAb 兔抗脑组织抗体 规格： 48T/96TAECA 兔抗内皮细胞抗体 规格： 48T/96TAMA 兔抗单核细胞抗体 规格： 48T/96TMMP-2 兔基质金属蛋白酶 2/明胶酶 A 规格： 48

21、T/96TMMP-1 兔基质金属蛋白酶 1 规格： 48T/96TTn- 兔肌钙蛋白 规格： 48T/96TcAMP 兔环磷酸腺苷 规格： 48T/96TRANKL 兔核因子 B 受体活化因子配基 规格： 48T/96TPPAR- 兔过氧化物酶体增殖因子活化受体 规格： 48T/96TOPN 兔骨桥素 规格： 48T/96TLebtospira 兔钩端螺旋体 IgG 规格： 48T/96TCA 兔儿茶酚胺 规格： 48T/96Ths-CRP 兔超敏 C 反应蛋白 规格： 48T/96TC3 兔补体蛋白 3 规格： 48T/96TPY 兔吡啶交联物 规格： 48T/96TCys-C 兔半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素 C 规格： 48T/96TIL-17 兔白介素 17 规格： 48T/96T