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线虫RNA干扰的基因沉默一、实验背景及目的1、 RNA干扰(RNAi)是一种使基因使失活的有效方法,在线虫中,RNA干扰因为简单快速成为研究基因功能的有效手段。2、 秀丽线虫是一种生活在土壤中的线虫,长约1mm,直径70um,由959个细胞组成。它具有生活周期短、易培养和保存等优点。秀丽线虫具有雌雄同体和雄性个体两种性别。雌雄同体的线虫有两条X染色体和5对常染色体。其基因组大小为80Mb,包含13000个基因。秀丽线虫在20时生活周期为3.5天,25时约为3天,15时约为6天。受精卵经过胚胎发生孵化出L1、L2、 L3 、L4,最后成为成熟的幼虫。当食物缺乏或群体密度过大等环境不良的条件时,L2会不进入L3而成为dauer幼虫来抵御不良环境,当环境恢复后dauer幼虫不经过L3直接进入L4。因此可以利用该特性保存线虫品系。3、 RNAi是一种基因knock down 技术,将体外合成的含有目的基因的dsRNA通过某种方式引入到线虫体内,导致其体内相应的目的基因mRNA降解,从而达到基因沉默的目的。通过显微注射dsRN
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