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直尺 20微升枪头（灭菌） 无血清培养基 PBS准备：所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）流程：1。先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔0.51cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2。在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。3。第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。4。用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。5。放入37度5%co2培养箱，培养。按0，6，12，24小时取样，拍照。NOTE6空板可以保证有相当距离的平直划痕，我觉得挺不错的。而且因为有5条定位线，与划痕相交，这样就有10个可固定监测点，不作重复，误差也很小。如果你连续监测24小时，你需要考虑到划痕缩小是细胞迁移和细胞繁殖共同作用的结果，而不是单纯的细胞迁移。如果你要单纯的考虑细胞迁移，你可以先用丝裂霉素（1ug/ml）处理一小时，抑制细胞的分裂，这样你的结果就是细胞迁移的作用了。照片拍完
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