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细胞培养工作流程14页.docx

细胞培养工作流程一、 Vero细胞复苏流程1、 准备1.1工作地点检查:检查台面、地面是否洁净,确认无不相关物品。1.2设施检查:确认空调、传递窗工作状态完好。1.3层流罩准备:开启层流罩,观察其运行是否正常,用消毒剂将台面、墙面、地面、保护帘及层流罩内设备进行清洁消毒。并运行30分钟后开始生产操作。1.4操作工具和试剂检查:检查本次操作所用灭菌物品外包装是否严密,是否在效期内。检查本次操作所用溶液/试剂瓶内是否有异物,瓶表面是否有裂纹,瓶塞是否松动,溶液名称、批号、数量、有效期是否符合要求。合格后用消毒剂擦拭外表面后拿入层流罩。复苏、换液用液体:MEM液、新生牛血清、3%谷氨酰胺溶液、庆大霉素、7.5%NaHCO3溶液。1.5复苏用水准备:(1)融化种子用溶液:按1L/1支种子准备391含0.1%新洁尔灭溶液。(2)百级内消毒种子用水:1L/1支种子准备36.51含0.1%新洁尔灭溶液。 1.6操作人员进入层流罩:穿一层无菌连体服并戴无菌手套,静止5分钟后方可操作。1.7溶液使用前处理:辅助人员用

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