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胶回收相关问题2页.doc

胶回收DNA注意事项一、胶回收DNA注意事项1.用相对比较薄的胶来跑电泳,通常只要够点样即可,或是采用薄而宽的梳子来跑胶,以减少回收胶的体积。2.DNA的浓度要足够大。3.紫外灯下切下含待回收DNA的凝胶时,要衬以干净的塑料薄膜,刀片要清洗,防止外源DNA的污染。4.回收效率低:a.胶未完全溶解,可适当延长水浴时间,并增加上下颠倒次;b.胶块体积太大,应先将其切为小块,分多次回收;c.电泳缓冲液pH太高;d.漂洗液中未加入无水乙醇;e.改用去离子水洗脱。5.洗脱液体积不能小于说明书提供的最小洗脱体积。6.胶块不溶:a.琼脂糖质量不好;b.含目的片段的凝胶再空气中放置过久,建议切胶后立即进行回收或将胶块保存在4或-20;c.制胶的电泳缓冲液浓度过高或陈旧。7.溴化乙锭(EB)为致癌剂,操作时应戴手套,尽量减少台面污染。8.电泳指示剂:核酸电泳常用的指示剂有两种,溴酚蓝(bromophenol blue, Bb)呈蓝紫色;二甲苯晴(xylene cyanol, Xc)呈蓝色,它携带的电荷量比溴酚蓝少,在凝胶中的的迁

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