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细胞培养-复苏-传代换液-冻存计数(自编)12页.doc

细胞培养程序材料A、仪器1. 净化工作台,2. 离心机,3. 恒温水浴箱,4. 冰箱(4)5. 倒置相差显微镜,6. CO2培养箱,7. 振荡混合仪8. 酶联免疫检测仪,9. 移液枪,10. 电磁力搅拌机,11. 微孔滤器B、玻璃器皿1. 吸管,2. 小烧杯(100ml),3. 废液缸,C、塑料器皿1. 吸头,2. 枪头,3. 96孔培养板,4. 15ml离心管,5. 50ml离心管,6. 胶塞,D、其他物品 1. 微量加样枪,2. 红血球计数板,F、试剂1. D-Hanks液,2. 小牛血清,3. RPMI1640,4. 双抗(青霉素、链霉素),5. 0.25%胰酶,6.0.025% EDTA 7. 二甲基亚砜(DMSO),8. MTT溶液:称取250mgMTT,放入小烧杯中,加50ml培养液或平衡盐溶液在电磁力搅拌机上搅拌30min,用0.22um的微孔滤器除菌,分装,4保存备用,两周内有效。一、原代细胞培养或细胞株(系)复苏培养:(一)细胞原代培养1.贴壁细胞培养法:1)、组织块培养法 将

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