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精选优质文档-倾情为你奉上外周血中PBMC分离原 理 外周血各种血细胞的密度不尽相同,利用淋巴细胞分层液(Ficoll)作密度梯度离心,使一定比重的细胞群按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离。 实验步骤:1.采血,稀释(外周血:稀释液=1:2)2.在离心管中加入Ficoll,沿倾斜的管壁缓缓加入稀释的外周血(Ficoll:稀释血=1:2)3.18,1500r/min,离心30min4.轻轻吸取PBMC层移入另一试管中5.加足量稀释液充分洗涤,1800 r/min离心5min ,弃上清。分离全血中的PBMC注意事项:1 每毫升外周血液大约可获1106单个核细胞2 Ficoll应适量,外周血应充分稀释,温度直接影响到Ficoll的比重和分离效果3 在Ficoll上加入稀释外周血时,应缓慢加,以免冲散界面4 吸取单个核细胞层时,应避免吸出过多的上清液或分层液而导致血小板污染专心-专注-专业
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