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电镜切片样品制作步骤(共2页).docx

精选优质文档-倾情为你奉上扫描电镜样品的准备A 悬浮培养的细胞、细菌、血细胞、精子等;细胞使用PBS或无血清培养基离心漂洗12次以去除血清,离心转速依据不同离心机、不同样品自定,总时间控制在5min内;细胞团根据预设浓度在适量2.5%戊二醛吹悬,滴加在预先置入青霉素小瓶中的托盘,4静置沉降23天,在托盘周围加入PBS,以防止样品干燥。B贴壁培养的细胞:在培养皿中预先加入盖玻片,使细胞贴附于盖玻片上;PBS或无需请培养基漂洗后,放置在培养板室温固定1h,4 3 h,注意放置干燥,自行转入青霉素小瓶中,加满PBS送检。SEM标本处理必须使用玻璃容器,需明确所用盖玻片尺寸可以放入青霉素瓶。C组织取材样品观察表面可达810mm2,高度小于5mm左右;样品表面在固定前必须清洁:使用生理盐水或PBS冲洗掉表面的灰尘以及不需要观察的蛋白、粘液等。能够明确标识标本的观察面。消化道、呼吸道、血管、生殖器官、泌尿等官腔内表面,尤其要注意先清洗再固定。如需要观察脏器内结构,应依照不同的实验目的,决定目的脏器是否需要灌注清洗; 固定2.5

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