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精选优质文档-倾情为你奉上实验二 苹果中多酚氧化酶最适 pH 的测定1、 实验原理存在于果蔬中的多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)在适宜的条件下能引起果蔬的酶促褐变。因此,多酚氧化酶对于食品加工具有重要意义。多酚氧化酶是一种含铜离子的酶,它能催化两类不同的反应。一是一元酚羟基化,二是邻-二酚氧化。在一些植物中,多酚氧化酶能同时催化这两类反应;而在另一些植物中,多酚氧化酶仅能催化邻-二酚氧化,却不能催化一元酚羟基化。如果采用邻-二酚作底物,那么随着酶催化反应进行,反应混合物的吸光值因邻-苯醌的量的增加而增大,因此可采用分光光度法测定多酚氧化酶的活力。2、 试剂和仪器试剂:0.2mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液,pH分别为3.6、4.0、4.6、5.0和5.6、0.2mol/L磷酸盐缓冲液,pH分别为6.0、6.5、7.0、7.5和8.0、0.01mol/L儿茶酚溶液、0.05mol/L磷酸盐缓冲液,pH=6.5、丙酮仪器:组织捣碎机、抽滤装置、721分光光度计(含比色皿)、秒表、常规玻璃仪器、离心机三、实验步骤1、从苹果中萃取多
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