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精选优质文档-倾情为你奉上大蒜SOD的提取与分离1、 实验目的： 1、熟悉大蒜SOD的提取与分离方法 2、掌握SOD活力测定NBT光化还原法的原理3 熟悉G-250法对蛋白浓度的测定以及PAGE电泳的操作方法2、 实验的原理1、通过研磨和高速离心的方法粗提大蒜SOD,再经过丙酮沉淀得到SOD酶液2、由于SOD是含金属辅基的酶，通过氮蓝四（NBT）光还原法测定酶的活性。NBT在蛋氨酸和核黄素存在的条件下，照光后发生光化还原反应而生成蓝色甲腙，在560nm处有最大光吸收。SOD能抑制NBT的光化还原，其抑制强度与酶活性在一定范围内成正比。3考马斯亮蓝G250与蛋白质通过疏水结合作用后，变为蓝色，在波长为595nm处测得吸光度，用EXCEL软件得出标准曲线，从而得到待测的蛋白浓度。3、 实验的材料和试剂（1）新鲜蒜瓣；（2）磷酸buffer（0.05mol/L，pH7.8）；（3）氯仿：无水乙醇（3:5，V/V）；（4）丙酮，冷却至410四、实验步骤1、SOD的提取称取150g大蒜蒜瓣
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