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精选优质文档-倾情为你奉上授课对象: 06级检验1-5班课 时: 2学时甲胎蛋白(AFP)测定目 标:1.掌握ELISA法测定AFP的原理及注意事项 2.熟练地进行AFP测定 3.了解AFP测定的主要临床意义实验用品: AFP测定试剂盒、酶标仪内 容:原理:本试剂盒采用针对抗原不同,决定簇的双单克隆抗体分别制备成包被板和酶结合物,利用ELISA双抗夹心法原理检测人血清中AFP含量。操作步骤:1. 加样:将包被孔编号,留1孔作空白对照,其余孔用微量加样器依次加入标准及待测样品各100ml。2孵育:置37温育30min。3洗涤:甩去孔内液体,在各孔内加入洗涤液2滴,轻轻震荡35次,弃之,然后用蒸馏水加满各孔,甩掉;反复5次最后在吸干纸上拍干。4加酶结合物:每孔加入酶结合物100ml,空白孔不加。5置37温育15min。6重复步骤“3”。7显色:每孔加入底物50l,再加显色剂50l,充分混匀,室温避光反应25min。8
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