1、 1 毕业论文 任务书 生物技术 大肠杆菌甘露醇 -1-磷酸脱氢酶基因的克隆与表达 一、研究目的和意义 土壤盐渍化是影响农业生产和生态环境的严重问题。随着生物技术的发展，通过基因工程育种，即直接导入耐盐基因，使转基因作物获得耐盐性状是提高盐碱土壤利用率的有效途径 。近年来不断有克隆生物的耐盐基因并将它转入植物，从而提高其耐盐性的报道。通过从大肠杆菌菌株中成功克隆到的甘露醇 -1-磷酸脱氢酶基因，构建到原核表达载体后实现了高效表达，从而为通过基因工程方法培育耐盐作物奠定了基础。 二、主要内容与基本要求： 主要内容： 1、 PCR 法扩增大肠杆菌甘露醇 -1-磷酸脱氢酶基因及 PCR 产物的纯化
2、2、 E.coli DH5菌株感受态细胞的制备和重组质粒的转化 3、重组子的鉴定及转化 4、重组质粒表达的蛋白的提取及鉴定 5、重组 E.coli DH5菌株的耐盐性研究 基本要求： 获得重组质粒，并使重组 E.coli DH5 具有耐盐性。 三、计划进度： 2011 年 03 月 -2011 年 04 月：查阅文献，撰写开题报告及任务书。 2011 年 05 月 -2011 年 06 月：收集相关资料，熟悉实验步骤，准备实验材料； 2011 年 07 月 -2011 年 10 月： 开展实验，得到实验结果及数据； 2011 年 11 月 -2011 年 12 月：查阅文献，完成综述及外文翻译
3、； 2012 年 01 月 -2012 年 03 月：完成数据的处理、论文撰写。 2 四、主要参考文献： 1 Lin Q.F., and Li G.Y.Research progress in salt tolerance in plants, Shengwu Gongcheng Jinzhan (China Biotechnology),2000,20(2):20-25. 2 Liu GF,Tan J,Chen QW.Cloning and expression of mannitol-1-phosphate dehydrogenase gene of Pseudomonas 4902J.
4、Oceanologia Etlimnologia Sinica,2004,35(2):183-188. 3 Liu JJ,Peng XX,Wang HY,et a1.Cloning,Sequencing and high level expression of mtlD gene and gutD gene from Escherichia ColiJ.Chinese Journal of Biotechnology,1995,11(2):157-161. 4 Baoshan Wang,Kefu Zhao,Qi Zou. Advances in mechanism of crop salt t
5、olerance and strategies for raising crop salt toleranceJ.Chinese Bulletin of Botany,1997,14(2):25-30. 5 Allakhverdiev S I,Nishiyama Y,Suzuki I et al. Genetic engineering of the unsaturation of fatty acids in membrane lipids alters the tolerance of Synechocystis to salt stressJ.PNAS.1999,96(10): 5862-5867.
