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精选优质文档-倾情为你奉上 分光光度法测定纤维素酶酶活1 适用范围本方法适用于纤维素酶酶活的测定。2 测定原理纤维素酶在一定温度与pH条件下,水解纤维素分子中糖苷键,生产纤维素寡糖、纤维二糖和葡萄糖,在碱性条件下,3,5-二硝基水杨酸与还原糖发生氧化-还原反应,生产3-氨基-5-硝基水杨酸。其产生物在煮沸条件下 ,其颜色深浅与还原糖含量成正比,可用分光光度法测定。根据吸光度计算其酶活力。酶活单位的定义:每1mL粗酶液,在一定温度和pH值条件下,1min水解纤维素产生1g还原糖为一个酶活力单位,以(u/mL)表示。3 仪器和设备3.1 分析天平:精度为0.0001g。3.2 紫外分光光度计。3.3 恒温水浴锅:精度0.2。3.4 PH计:精度为0.01PH单位。4 试剂和溶液除非另有说明,在分析中仅使用分析纯试剂和蒸馏水。4.1 柠檬酸缓冲液(pH=5.0)磷酸氢二钠溶液(0.2mol/L):称取7.16g磷酸氢二钠溶解于蒸馏水中,定容至100ml。 柠檬酸溶液(0.1mol/L):称
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