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精选优质文档-倾情为你奉上体系一酶和蛋白质提取消过毒的打孔器进行伤口处理后，在每个伤口处添加50mL以下处理：（1）无菌水，对照；（2）浓度为1000mg/mlGA3；（3）浓度为1 104 spores/mlP. expansum孢子悬浮液；（4）浓度为1000mg/mlGA3+浓度为1 104 spores/mlP. expansum孢子悬浮液。处理后湿纱布覆盖并用PE塑料膜密封作保湿处理。贮藏于常温（20-25）下。分别在0、12、24、36和48小时取样进行测定酶活性。取样时沿伤口用刀小心切下1g果实组织，加入10 mL冷(4)的50 mmol/L磷酸缓冲液（PBS）内含1.33 mmol/L EDTA和1% PVPP缓冲液(pH 7.8)。研钵加入少量液氮预冷后，在冰浴中碾磨，破碎组织，然后在冷冻离心机12000rpm离心15分钟。取上清液供酶活性和蛋白质含量用。蛋白质含量测定试验材料和试剂：牛血清白蛋白标准溶液：准确称取100mg 牛血清白蛋白，溶于100mL 蒸馏水中，即为1 000gmL的原液。8.1.2 蛋白试剂考马斯亮蓝G
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