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Lowry法检测蛋白质的含量(共2页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上Lowry法检测蛋白质的含量一、实验原理:首先在碱性条件下蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜复合物,该复合物加入酚试剂后产生蓝色复合物。该蓝色复合物在650nm处的吸光度值与蛋白质的含量成正比,根据供试品的吸光度,计算供试品的蛋白质含量。二、配液碱性酒石酸盐溶液:称取无水碳酸钠20.0g,氢氧化钠4.0g,酒石酸钾钠0.2g,加水至1L,溶解混匀。硫酸铜溶液:称取硫酸铜(CuSO45H2O)1.0g,加水至200ml,溶解混匀。碱性铜溶液(现用现配):量取溶液A 100ml,溶液B 2ml,混匀即得。 标准蛋白质储备液(1mg/ml):用纯化水将牛血清白蛋白对照品定量稀释至1mg/ml,混合均匀,用1.5ml离心管分装,1ml/管,贴好标签,于-20或以下低温冰箱贮存。标准蛋白质工作液(100g/ml):将标准蛋白质贮备液用前10倍稀释至100g/ml。 阳性对照(约50g/ml的牛血清白蛋白溶液) :精密称取牛血清白蛋白25mg,加纯化水溶解,加入500ml容量瓶中,定容至刻度,混合均匀,冷冻管分装,每管2.5

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