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精选优质文档-倾情为你奉上HEK293细胞瞬时转染应该注意哪些呢？作者：北京义翘神州瞬时转染已经是现在实验室常用的将重组DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中，重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因且高水平的表达。瞬时表达法具有很多优点：如操作简易和周期短，表达效率高，安全高效，不需要筛选基因，能在完整植株上进行。HEK293作为常用的重组蛋白质表达细胞株，常用来进行瞬时转染操作的载体。那么，在应用HEK293细胞进行瞬时转染时有哪些方面需要注意的呢？首先，一定要在无菌条件下进行操作。在开始操作之前，需要清洁并设置生物安全柜参数，即紫外杀菌30min，风机工作10min后方可使用。第二，转染前准备工作：将密度为0.3-0.35X106cells/ml 的HEK293F细胞传代接种于20ml培养基中，在36.5，175rpm，5%CO2 的条件下培养。3天后细胞密度约2-3X106cells/ml 时用培养基SMM 293 TI稀释处理细胞密度到1X106cells/ml，每瓶细胞液体积为20mL，然后旋紧瓶口放入摇床继续培养，2-4小时后
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