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精选优质文档-倾情为你奉上Lowry法测定蛋白质浓度1.原理本法用于微量蛋白质的含量测定。蛋白质在碱性溶液中可形成铜蛋白质复合物,此复合物加入酚试剂后,产生蓝色化合物,该蓝色化合物在650nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,根据供试品的吸光度,计算供试品的蛋白质含量。2.试剂 (1)酚试剂 来源:a.配制:取钨酸钠(Na2WO42H2O)l00g和钼酸钠(Na2MoO3)25g,置1500ml蒸馏瓶中,加入700ml水,85%磷酸50ml,盐酸100ml,上连回流管(使用木塞或锡纸包裹的橡皮塞)微沸回流10h。取下回流管,加入l硫酸锂(Li2SO4H2O)150g,水50ml,溴液几滴,煮沸约15min,去除过量的溴,冷却加水至1000ml,过滤,为酚试剂贮备液。酚试剂贮备液用NaOH滴定液(0.5mol/L)测定酸浓度,然后加水稀释至相当于1mol/L盐酸浓度。b.购买:市售酚试剂在使用前用0.5mol/L NaOH滴定液,以酚酞为指示剂,根据试剂酸度将其稀释,使最后酸度为1N。(2)碱性铜溶液 取0.1mol/L酒石酸钾溶液
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