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目的基因(COR)转入受体细胞的方法及检测(共9页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上目的基因(COR)转入受体细胞的方法及检测学生:魏烈斌 指导老师:高海宁(河西学院农业与生物技术学院 甘肃 张掖 )摘要: 利用PGEMT -easy质粒为载体,用CaCl2法制备感受态细胞,把人工合成的抗氨苄青霉素的基因导COR基因导入大肠杆菌,通过含有氨苄青霉素的选择培养基筛选出含有抗氨苄青霉素基因的大肠杆菌,对筛选出的大肠杆菌用碱裂解法进行质粒DNA提取,并对质粒进行PCR扩增和酶切凝胶电泳图的分析。用EcoRI酶进行酶切研究。结果表明:人工合成的抗氨苄青霉素的基因在大肠杆菌中跟随质粒的复制进行同步复制并通过大肠杆菌自身的表达系统表达出了抗氨苄青霉素的产物,使大肠杆菌能在含氨苄青霉素的LB培养基上正常生长。关键字: PGEM-Teasy质粒 抗氨苄青霉素 氯化钙法 大肠杆菌 引言:在DNA体外重组技术的研究和应用中,转化是个很重要的步骤。自Cohen等人在1972年首次用CaCl2:处理的方法成功地进行了R因子对E. colt C600的转化之后,这个方法一直广泛地应用于大肠杆菌

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