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农杆菌感受态制作和转化(共1页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上农杆菌感受态制作1. 取保存的菌种,在含相应抗生素的YEB固体培养基上划线,28、培养2436h至长出单菌落。2. 挑取农杆菌单菌落,接种于5ml含有相应抗生素的液体YEB培养基内。28、250rpm培养2436h,至菌液OD600约0.50.63. 按2%体积,将菌液加入含相应抗生素的液体YEB培养基中,28、250rpm培养至OD600为0.50.6。4. 4、5000rpm离心10min,收集菌体。5. 加入和扩大培养时培养液相同体积的70mmol/L CaCl溶液,重悬。6. 4、5000rpm离心10min,收集菌体。7. 加入体积为扩大培养时培养液1/10的70mmol/CaCl溶液,重悬。8. 分装为100L的小分,至于冰上备用。9. 若要冻存,需加入终浓度为15%20%的甘油。-80冻存。注:49步请注意无菌操作!专心-专注-专业

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