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实验:植物体内游离脯氨酸含量的测定(共2页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上实验:植物体内游离脯氨酸含量的测定植物在正常条件下,游离脯氨酸含量很低,但遇到干旱、低温、盐碱等逆境时,游离脯氨酸便会大量积累,并且积累指数与植物的抗逆性有关。因此,脯氨酸可作为植物抗逆性的一项生化指标。【原理】采用磺基水杨酸提取植物体内的游离脯氨酸,不仅大大减少了其他氨基酸的干扰,快速简便,而且不受样品状态(干或鲜样)限制。在酸性条件下,脯氨酸与茚三酮反应生成稳定的红色缩合物,用甲苯萃取后,此缩合物在波长520nM处有一最大吸收峰。脯氨酸浓度的高低在一定范围内与其消光度成正比。【仪器与用具】分光光度计;水浴锅;漏斗;20ml大试管;20ml具塞刻度试管9支;510ml滴管。【试剂】1、3%磺基水杨酸水溶液:3g磺基水杨酸溶于100mL蒸馏水中2、甲苯3、2.5%酸性茚三酮显色液:将 2.50 g 茚三酮于 60 mL 冰醋酸和 40 mL 6 mol/L 磷酸中,加热( 70 )溶解。(冰乙酸和6mol/L磷酸以3:2混合,作为溶剂配制,此液在4下2-3天有效)4、脯氨酸标准液:准确称取25mg脯氨酸

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