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多糖含量测定方法(共2页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上多糖含量的测定粗多糖中的总糖含量使用苯酚-硫酸法进行测定,还原糖用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定,多糖含量 = 总糖 - 还原糖。1、总糖含量测定实验原理:多糖在硫酸作用下,先水解成单糖,并脱水生成糖醛衍生物,与苯酚生成橙黄色溶液,在490nm处有最大吸收,吸收值与糖含量呈线性关系。试剂:浓硫酸(分析纯)、5%苯酚溶液(分析纯)、标准葡萄糖。操作步骤: 制作标准曲线:准确称取105 烘干至恒重的葡萄糖50mg于500ml容量瓶中配成0.1 mg/ml 的标准溶液,用蒸馏水分别配成0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 mg/ml。1 ml标准液分别加入 5% 苯酚溶液1 ml,并迅速加入浓硫酸5 ml,静置10 min。摇匀,30放置30 min后于490nm测定OD值,以葡萄糖含量为横坐标,OD值为纵坐标,制作得到标准曲线。 样品含量测定:吸取1.0ml样品液,按照上述步骤操作测定OD490,并代入标准曲线计算样品的总糖含量。2、还原糖含量实验原理碱性条件下,DNS可与还原

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