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DNA 的琼脂糖凝胶电泳分析 制作小组:杜金红 王成强 汪强实验目的 v 掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA 的 原理和方法实验原理: v 琼脂糖凝胶电泳 v 1 、琼脂糖凝胶:天然琼脂是一种多聚糖,主 要由琼脂糖及琼脂胶组成。琼脂糖是由半乳 糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷。 琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖 ,由于这些集团带有点荷,在电场作用下能 产生较强的电渗现象。v 2 、DNA 的琼脂糖凝胶电泳:琼脂糖凝胶电 泳对核酸的分离作用与核酸的分子量、分 子构型和凝胶浓度密切相关。 v (1 )DNA 的分子大小 实验证明,DNA 片 段迁移距离与其分子量的对数成反比。通 过比较标准物与未知片段的移动距离便可 测出未知片段的大小。但当DNA 分子超过 20kb 时,普通琼脂糖凝胶就很难讲它们分 开。v (2 )核酸构型 不同构型的DNA 在琼脂 糖凝胶中的电泳速度差别较大。在分子 量相当的情况下,不同构型的质粒DNA 的移动速度次序为:共价闭环DNA 直 线DNA 开环的双链环状DNA 。这三种 构型的相对迁移速率主要取决于凝胶浓 度,同时也受到电流强度、缓冲液离子 强度等的影响
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