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灵芝饮片(破壁).DOC

1、1灵芝饮片( 破壁)LingzhiYinpian(Pobi)本品为多孔菌科真菌赤芝 Ganoderma lucidum ( Leyss. ex Fr. )Karst. 的干燥子实体经精细粉碎加工制成的饮片(破壁) 。【制法】 取灵芝饮片,粉碎成粗粉,灭菌;将灭菌后的粗粉进行精细粉碎得破壁粉,混匀,分装,即得。【性状】本品为黄棕色至棕褐色的粉末, 气微香,味苦涩。【鉴别】 (1)取本品 2g,加乙醇 30ml,加热回流 30 分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 2ml 使溶解,作为供试品溶液。另取灵芝对照药材 2g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法 (通则 0502)试验,吸取上述两种溶液各4l

2、,分别点于同一硅胶 G 薄层板上,以石油醚( 6090)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯 (365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品 1g,加水 50ml,加热回流 1 小时,趁热滤过,滤液置蒸发皿中,用少量水分次洗涤容器,合并洗液并入蒸发皿中,置水浴上蒸干,残渣用水 5ml 溶解,置 50ml 离心管中,缓缓加入乙醇 25ml,不断搅拌,静置 1 小时,离心(转速为每分钟 4000 转) ,取沉淀物,用乙醇 10ml 洗涤,离心,取沉淀物,烘干,放冷,加 4mol/L 三氟乙酸溶液 2m

3、l,置 10ml 安瓿瓶或顶空瓶中,封口,混匀,在 120水解 3 小时,放冷,水解液转移至 50ml 烧瓶中,用 2ml 水洗涤容器,洗涤液并入烧瓶中,60减压蒸干,用 70%乙醇 2ml 溶解,置离心管中,离心,取上清液作为供试品溶液。另取半乳糖对照品、葡萄糖对照品、甘露糖对照品和木糖对照品适量,精密称定,加 70%乙醇制成每 1ml 各含 0.1mg 的混合溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则 0502)试验,吸取上述两种溶液各 3l,分别点于同一高效硅胶 G 薄层板上,以正丁醇 -丙酮-水(5:1:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以对氨基苯甲酸溶液(取 4-氨基苯甲酸0.5g,溶

4、于冰醋酸 9ml 中,加水 10ml 和 85%磷酸溶液 0.5ml,混匀) ,在 105加热约 10 分钟,在紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。其中最强荧光斑点为葡萄糖,甘露2糖和半乳糖荧光斑点强度相近,位于葡萄糖斑点上、下两侧,木糖斑点在甘露糖上,荧光斑点强度最弱。【检查】 应符合以下中药饮片(破壁)指导原则项下的各项规定水分 不得过9.0%(中国药典2015版四部通则0832第二法)。总灰分 不得过 3.2%(中国药典2015 版四部通则 2302)。外观均匀度 取本品适量,置光滑纸上,平铺约 5cm2,将其表面压平,在明亮处观

5、察,应色泽均匀,无花纹与色斑。粒径分布 D90 值不得过 45.0m。未破壁细胞限度 取本品 0.1g,加水 10ml 使混悬,精密量取 0.1ml 置载玻片上,装片,置显微镜下观察,在 1010 倍视野下,大于 100m且完整的细胞的粉末数目不得过 10 个。微生物限度 照微生物限度检查法(中国药典2015 版四部通则1105、1106)检查,应符合规定。需氧菌总数 不得过 104cfu/g。霉菌及酵母菌数 不得过 102cfu/g。控制菌 不得检出沙门菌(10g);耐胆盐革兰阴性菌应小于102cfu( 1g)。【浸出物】 照水溶性浸出物测定法(通则 2201)项下的热浸法测定,不得少于 3

6、.0%。【含量测定】 多糖 对照品溶液的制备 取无水葡萄糖对照品适量,精密称定,加水制成每 1ml 含 0.12mg 的溶液,即得。标准曲线的制备 精密量取对照品溶液 0.2、0.4 、0.6、0.8、1.0、1.2ml,分别置 10ml 具塞试管中,各加水至 2.0ml,迅速精密加入硫酸蒽酮溶液(精密称取蒽酮 0.1g,加硫酸 100ml 使溶解,摇匀)6ml,立即摇匀,放置 15 分钟后,立即置冰浴中冷却 15 分钟,取出,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(通则 0401) ,在 625nm 波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。供试品溶液的制备 取本品

7、约 2g,精密称定,置圆底烧瓶中,加水 60ml 静置 1 小时,加热回流 4 小时,趁热滤过,用少量热水洗涤滤器和滤渣,将滤渣3及滤纸置烧瓶中,加水 60ml,加热回流 3 小时,趁热滤过,合并滤液,置水浴上蒸干,残渣用水 5ml 溶解,边搅拌边缓慢滴加乙醇 75ml,摇匀,在 4放置12 小时,离心,弃去上清液,沉淀物用热水溶解并转移至 50ml 量瓶中,放冷,加水至刻度,摇匀,取溶液适量,离心,精密量取上清液 3ml,置 25ml 量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得。测定法 精密量取供试品溶液 2ml,置 10ml 具塞试管中,照标准曲线制备项下的方法,自“迅速精密加入硫酸蒽酮溶液 6ml”

8、起,同法操作,测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的含量,计算,即得。本品按干燥品计算,含灵芝多糖以无水葡萄糖(C 6H12O6)计,不得少于0.90%。三萜及甾醇 对照品溶液的制备 取齐墩果酸对照品适量,精密称定,加甲醇制成每 1ml 含 0.2mg 的溶液,即得。标准曲线的制备 精密量取对照品溶液 0.1、0.2 、0.3、0.4、0.5ml,分别置15ml 具塞试管中,挥干,放冷,精密加入新配制的香草醛冰醋酸溶液(精密称取香草醛 0.5g,加冰醋酸使溶解成 10ml,即得)0.2ml,高氯酸 0.8ml,摇匀,在 70水浴中加热 15 分钟,立即置冰浴中冷却 5 分钟,取出

9、,精密加入乙酸乙酯 4ml,摇匀,以相应试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(通则 0401) ,在 546nm 波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线。供试品溶液的制备 取本品约 2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加乙醇50ml,超声处理(功率 140W,频率 42kHz)30 分钟,滤过,滤液置 100ml 量瓶中,用适量乙醇,分次洗涤滤器和滤渣,洗液并入同一量瓶中,加乙醇至刻度,摇匀,即得。测定法 精密量取供试品溶液 0.2ml,置 15ml 具塞试管中,照标准曲线制备项下的方法,自“挥干”起,同法操作,测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中齐墩果酸的含量,计算,即得。本品按干燥品计算,含三萜及甾醇以齐墩果酸(C 30H48O3)计,不得少于0.50%。 【性味与归经】 甘,平。归心、肺、肝、肾经。4【功能与主治】 补气安神,止咳平喘。用于心神不宁,失眠心悸,肺虚咳喘,虚劳短气,不思饮食。【用法与用量】 冲泡服用;日用量 612g,分 23 次服用;或遵医嘱。【贮藏】 密封。【有效期】 暂定24个月

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